喷洒法在制备涂胶载玻片及应用.pdfVIP

色清晰，没有过染和着色不良现象，细胞核和细胞浆上色均好，对比明显，未发现组织和细胞有收缩或肿 胀。初步体会GSA试剂H．E染色可靠。完全可以替代常规组织固定；石蜡切片和HE染色。也适用于免 疫组化和多种特殊染色。具有创新和推广价值。可以向国内外申请专利，扩大市场。在此衷心感谢格林公 司为病理周行作出的努力，希望格林公司为全国乃至全世界病理同行开创一个无害环保的新世界。 喷洒法在制备涂胶载玻片的应用 周航波，马恒辉，章如松，周晓军 (南京军区南京总医院病理科210002) 【摘要】目的：采用喷洒法作为对浸泡法和推抹法自制涂胶载玻片两种制作方法的补充。方法：取市售 的载玻片，清除包装后放在塑料篓里，置入清洗液浸泡过夜。取出后自来水冲洗干净，蒸馏水过一遍，将 单面磨砂载玻片有磨砂的一面朝上，均匀地排列在金属网隔上面，直接放入60℃烤箱中烤干备用。将烤 好的铺有单面磨砂载玻片的金属网隔从烤箱中取出。把100ml按l：10比例稀释的多聚赖氨酸液装入喷壶 中。调节喷壶的旋钮至气雾状喷洒方式，轻轻地按压，由一侧向另一侧均匀地喷洒l～2次多聚赖氨酸液。 将喷洒好的载玻片放在金属网隔上面，置入60℃烤箱1h，或放置于室温(18-～26℃)过夜。结果l喷洒 法制作的涂胶载玻片，与浸泡法和推抹法制作的涂胶载玻片相比，使用效果相同。结论：使用喷洒法制作 涂胶载玻片，与浸泡法和推抹法制作的涂胶载玻片相比，使用效果相同。优点在于，集中喷洒，批量处理， 简便经济，值得借鉴。 【关键词】载玻片；涂胶；浸泡；推抹；喷洒 在免疫组织化学染色等病理技术方法中，经常需要将载玻片用粘合剂预处理，以减少组织或细胞的损 失。虽然市场上已有成品涂胶载玻片出售，但是因其价格较高，仍有不少实验室采用浸泡法和推抹法自制 涂胶载玻片。前者使载玻片两侧均粘有涂胶液，后者仅在使用面覆有涂胶液，两者均在不同程度的存在些 许不足之处。为此，在实际工作中，我们采用喷洒法作为对两种制作方法的补充【11，现介绍如下。 1材料与方法 1．1材料 (2)家用花洒式喷壶，规格为500ml，内设直线状和气雾状两种喷洒方式。(3)隔水式电热恒温培养箱， 上海跃进医疗器械厂，PYX—DHS-40x50．BS，功率440W，频率50Hz，温度范围室温5C--60℃，电源电 压交流220V，内附四层金属网隔，大小为40 cmx40cm。(4)清洗液(称取重铬酸钾300 g，溶于3000rrd 蒸馏水中，然后沿着容器壁缓慢加入浓硫酸300 m1)。(5)多聚赖氨酸(购自基因有限公司)。 1．2方法 1．2．1载玻片的准备取市售的载玻片，清除包装后放在塑料篓里，置入清洗液浸泡过夜。取出后自来水 冲洗干净，蒸馏水过一遍，将单面磨砂载玻片有磨砂的一面朝上，均匀地排列在金属网隔上面，直接放入 60℃烤箱中烤干备用。 1．2．2制作涂胶载玻片 (1)将烤好的铺有单面磨砂载玻片的金属网隔从烤箱中取出。(2)把100ml按 l：10比例稀释的多聚赖氨酸液装入喷壶中。(3)调节喷壶的旋钮至气雾状喷洒方式，轻轻地按压，由一 侧向另一侧均匀地喷洒1～2次多聚赖氨酸液。(4)将喷洒好的载玻片放在金属网隔上面，置入60(2烤箱 l h，或放置于室温(18--一26℃)过夜。 2结果 喷洒法制作的涂胶载玻片，与浸泡法和推抹法制作的涂胶载玻片相比，使用效果相同。三种涂胶载玻 片制作方法的比较详见表l。 表l三种涂胶载玻片制作方法的比较 3讨论 免疫组织化学染色及其它病理技术方法，经常需要将载玻片用粘合剂预处理，以减少组织或细胞的损 失。粘合剂的种类较多，多聚赖氨酸为最常用的粘合剂。多聚赖氨酸被覆的载玻片市场可直接购买，但是 价格较高。 为此，不少实验室采取自己制备涂胶载玻片的方法，其中以浸泡法和推抹法为常用方法。前者如果把 载玻片放置在五片装立式染色缸内浸泡，则随着载玻片的提插，涂胶液容易残留在染色缸的内壁，造成不 必要的浪费；如果插入染色架后集中放入500ml以上的染色缸内浸泡，虽然使载玻片两面都被覆有多聚赖 氨酸液，但是不甚经济，因随着载玻片浸泡次数的增多，多聚赖氨酸的液量会逐渐下降，对涂胶片的制