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14 中国兽医杂志 2014年 (第50卷)第8期 ChineseJoumalofVeterinaryMedicine
诊断，从送检鸭脑组织中分离到2株细菌 ，经过对 表1 spa基因PCR扩增弓I物序列
分离株的16SrRNA基 因序列分析鉴定为猪丹毒 引物名称 引物序列 引物位置
丝菌 ，并通过小 鼠感染试验对分离株的毒力进行 ErrABCF 5-ATGAAAAAGAAAAAACACCTA兀TCCG一3 1-27
EryA813R 5—GCG CTCCGC CCA-3 813-795
了检测 ，同时，采用生长凝集试验对3个不同鸭场
ErrBIOOOR 5-CA 删 CCC， GAGCCTCAACCA-3 904-881
的种鸭血清样本进行了检测。 EryCIO1IR 5一TGCCTCAACTACGGT1rGATACG-3’ 1011-989
1 材料与方法 ‘ 多重PCR20 反应体系：IOI~LPCRMix(Genestar)，
上、下游引物各0．5 L(10I~mol／L)，模板DNA1L，
1．1 病例概况 病例 1为60周龄北京鸭父母代
加水至20 L。PCR的反应条件为：95℃，5min；
种群 ，临床表现为死淘率偏高 ，日均死亡率为
95℃，40S，55℃，40S，72oC，1min，30个循环 ；之后
0．2％～O．3％，饮水应用多种抗生素未能降低死亡
72℃延伸7min。反应结束后 ，取5 LPCR扩增产
率 ，送检4只，剖检主要表现为肝脏轻度肿大、质
物用 1％的琼脂糖凝胶中进行电泳检查。
脆 ，个别鸭脾脏肿大 ，其他脏器无 明显 的肉眼
1．2．4 细菌药物敏感性检测 将细菌接种于TSB
病变。
培养基，于37℃摇振培养过夜，之后将菌液浓度
病例2为4O周龄北京鸭父母代种群 ，鸭群外
调整至 10CFU／mL，均匀涂布于TSA平板上，然后
表正常 ，但产蛋最高峰始终维持在84％左右。送
放置不同药敏纸片 (购 自北京天坛药物生物技术
检3只死淘鸭，剖检无明显的肉眼病变。
开发公司)，37℃培养 18h后读取结果。
1．2 病原分离和鉴定
1．2．5 病毒分离 为了检查鸭群是否发生病毒性
1．2．1 细菌分离培养 取脑 、肝脏组织分别接种
感染，在进行细菌培养的同时，取肝脏、脾脏和脑
于添加2％小牛血清的胰酶大豆琼脂平板 (TSA，
组织混合后 ，加灭菌缓冲液制成20％悬液 ，研磨
BD公司)，于烛缸 37℃培养24h，观察细菌生长
并冻融2次后 ，用孑L径O．22 m滤器过滤除菌 ，经
情况。待细菌生长后 ，挑取可疑菌落划线接种于
尿囊腔途径接种5枚 9Et龄鸭胚
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