内皮祖细胞移植治疗心血管疾病的新策略：基因修饰.pdfVIP

维普资讯 中国微循环2006年 l0月第 10卷第 5期 文章编号：1007—8568(2006)05-0381-03 · 综述 · 内皮祖细胞移植治疗心血管疾病 的新策略：基因修饰 肖方毅 ．张怀勤 中图分类号：Q21 文献标识码 ：A 1997年 Asahara等…首次从外周血 CD34 细 能力的特性去鉴定EPCs，认为EOCs更具备干细胞 胞中分离到内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells， 的特征 ]。并有研究表明两类 EPCs移植在促血管 EPCs)后 。围绕 EPCs的研究便迅速展开和深入。近 新生 [2和再 内皮化中[8]的效果是相当的。 年来，基因修饰EPCs移植在 以往 EPCs移植治疗心 1．2 分离和培养方法 EPCs的分离最初是通 血管疾病的研究取得一定成效的基础上得到发展， 过免疫磁珠分离得到的CD34 细胞，然后采用贴壁 并初步展现了美好的应用前景。 培养法获得 。这种方法虽然分离得到的CD34 细胞 1 内皮祖细胞概述 较纯，但是获得的细胞数少，而且有研究发现 CD34‘ 1．1 定义和分类 内皮祖细胞是指能分化为 干细胞也能分化为 内皮样细胞[6]。随后多数研究 内皮细胞的前体细胞，在成人外周血，人脐带静脉 者采用密度梯度离心法分离单个核细胞，然后用直 血和骨髓 中均有分布，且人外周血、脐带血 EPCs均 接贴壁筛选法来分离 内皮祖 细胞 。并用添加 了 来 自于骨髓。单从形态学上无法鉴别 EPCs，EPCs VEGF、bFGF等各种促 内皮细胞生长因子的特殊内 主要依靠细胞表面标记来识别 。但迄今为止，EPCs 皮细胞培养基进行培养扩增。最近 。有报道用一种 尚无统一的鉴定标准。近来有报道将EPCs分为两 StemQuick E的过滤装置分离单个核细胞可获得 种类型，早期 EPCs(earlyEPCs)和晚期EPCsL2(1ate 比密度梯度离心法纯度高的EPCsLl。 EPCs又称 OECs，EOCs)。前者为 以往大多数文献 1．3 动员因子 除内源性组织缺血能将 EPCs 报道的EPCs。4～7d形成 中央为圆形细胞周围为梭 动员到外周血外，迄今发现的外源性动员剂有：干 形细胞的典型的放射状集落，既表达内皮细胞系特 细胞因子 (SCF)、粒系集落刺激因子(G．CSF)、粒系 异性 抗原 ：eNOs、KDR、VE—cadhefin、vWF、CD144 巨噬系集落刺激因子 (GM—CSF)、血管内皮细胞生 等，又表达 CD45、CD11b、CD11C、CD14、CD68等单 长因子(VEGF)、他汀类药物 (statins)、基质源性因 核巨噬细胞相关抗原L3 j。此类 EPCs增殖能力 子 1(SDF一1)和血管生成素 1(angiopoietin一1)。 弱，通常增殖2～3周后即开始逐渐凋亡，后者为 2 2 内皮祖细胞移植在心血管疾病 中的应用 ～ 3周出现的EPCs，呈鹅卵石样的集落，一致表达 内皮祖细胞具有特异性归巢于缺血缺氧，血管 内皮细胞系特异性抗原，而不表达 CD45、CD14等 损伤组织，促进新血管形成的特性 。EPCs移植促进 造血干细胞特异性抗原，此类 EPCs增殖能力旺盛， 血管新生的机制可能有两方面：一是迁移到局部分 可连续传代培养 3个月而未见凋亡。以往认为 化成成熟的血管内皮细胞：二是通过 自分泌和旁分 EOCs是 EPCs分化的成熟阶段 。现在越来越多的研 泌机制分泌促血管生成的物质，如 VEGF、HGF(肝 究认为早期EPCs中绝大部分为 CD14 单核细胞来 细胞生长因子)、IGF一1(胰岛素样生长因子 1)、G— 源L4 ]，仅 有 一 小 部 分 CD14一细 胞 可 分 化 为 CSF等：EPCs还可横