外周血涂片的重要性.pdfVIP

5l6 !塑堡坐堕堡垫i鲤坠煎!墅￡些!鳇：Q堕塑!垒笪型婴：!些!!z塾旦尘 Frrc／cD3 HLA抗原是人类芒要组织相容性复台体(MHc)的表 准徽蛛，抗HLA—B27 PE。 1 l 2 仪器：美国BD公司流式细胞仪FAcscallhur。达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱置 l l 3实验对象：临床病例50例，临床症状与As相符，免疫反应，调节免疫应答的功能。HLA—B27基因属I型 辅助枪盎-饕风湿因子(一)，抗链“O”(一)。 MHc基因，基本表达在机体中所有有核细胞上，尤其淋巴 l 2 疗浪 细胞的表面有丰富的含量。HLA—B27抗原的表达与强直性 l 2，1染色：采静脉血lml，肝素抗凝。取30肛l抗HLA—脊柱炎有着高度相关性，90％以上的强直性脊柱炎患者 B27F】w，cr)3PE于试管中，加^50仙l抗凝血，混匀，室HLA—B27抗原表达为阳性，而强直性脊柱炎症状与其他疾 温避光孵育15分钟．然后加人1：IO稀释的裂艇液，待红病相似而难以确诊，因此HLA—B27的检测在病情渗断中有 细胞完全溶解后．40(19洗涤，弃上清．用PBs洗涤1次，重要意义。常规检测l{LA—B27的方法为微量细胞毒实验， 同上离心后弃去上清。然后加入适量PBs调节细胞悬液细 其抗血清为多克隆的，灵敏度与特异性都难达到100％，且 胞数，以备上机。 需密度梯度离心分离淋巴细胞，整个实验过程相当耗时且劳 l 22流式细胞仪检测：测试标本前先以标准微球调整机 动强度较大。我们通过双色直接免疫荧光单克隆抗体试剂抗 HLA—B27FITc／cD3 器，在Bn公司的ⅢA—B27自动软件下测定t5000个细胞， PE与成人外周血淋巴细胞特异性结 检测其中的【II．A—B27荧光强度，进行数据自动分析，最后 合，再利用流式细胞仪进行检测，无需分离淋巴细胞，操作 打印结果。 简便，自动化程度高，省时省力，患者当天即可拿到结果， 2结果 灵敏度可达100％，特异性达974％，结果稳定，重复性 检测结果，在龋阳性标记线左侧为阴性，右侧为阳性。 高，为mA—B27的检测开辟了新途径。 21 重复性观察：同份标本连续测定20次，经统计学分 参考文献 Johnson K．A sp∽讯c如rI{J^一 析，荧光强度无显著差异(．P005)。 [1] J，nel80nmonoc】on一丑I．hbody 34一135 22稳定性观察：测定5份标本，室温分别于0、2、4、6 B”[J]．Humanlmmun01，1985，14：I Albr耐lt H a…v【棚卅 J，Muller 小时分别测定三次取其均值，经统计学分析测得值均无显著 [2] HLA—B27”‘兀gby㈨f ㈣me叶[J]cllncheln，】987．33：】6】9一1923 性差异(P0，05)。 (收稿：20(J3一07—20) 3讨论 外周血涂片的重要性 冯书玲 (河北