中国对虾16SrRNA基因序列多态性第研究.pdfVIP

维普资讯 35一钿 动 鞠 学 研 究 2OOO，Feb．21{1)：35~40 CN53。‘lO4O／Q ISSN0254。‘5853 中国对虾 16SrRNA基 因序列多态性的研究 2 ，5 邱高峰 常林瑞 巧婷 方雄英 楼允东 产 面-院上海 200090q】@册1ine．sh．饥) 摘要 ：利用PcR技术扩增获得中国对虾 ( 阳 chi~,n．su)线粒体DNA的16SrRNA基因片段，通过测 定该基因片段的序列，分析了取 自我国烟台、长岛、青岛近海和宁波养殖的17只中国对虾遗传多态性。结果 发现，不同地理种群存在丰富的DNA序列多态性，17只个体具有 17种基因型，在扩增的长为523 的基因片 段中，共捡测到37个多态性核苷酸位点 (7．07％)。UPGMA法构建的分子系统树表明不同地理种群中国对虾 存在一定程度的遗传分化，长岛群体与烟台群体遗传关系较近，宁波群体次之，青岛群体为相对独立的一支。 关键词：t旦堑虹；骘蕉蓬 ；16SrlLNA；DNA~J；多态性 ^l誊鸯性．敞 中田分类号：959．22363 文献标识码：A 文章编号：02．54—5853(2000)01—035—06 中国对虾 (Perweuschinensis)广泛分布于我 技术研究澳大利亚东西海岸斑节对虾 (P．monodo ) 国黄海、渤海，东海和南海也有少量分布，是我国 野生种群 ，发现了丰富的多态性 。尽管如此，由于 最重要的海水养殖虾类 ，年总产量创造过 70万吨 mtDNA纯化较为困难，纯化产量低，尚不能满足 的世界记录。但与其他对虾类养殖相似，迄今为止 限制性酶切消化 的需求 ，故有关对虾类 mtDNA 养殖的对虾均为未经遗传选育的野生种群 。尚未形 RFLP分析的报道较少。PCR技术的诞生 ，使得不 成养殖品系。加之各种人为和 自然因素的影响及对 需进行分子克隆就可通过扩增直接测定基因序列成 虾病 的猖獗 ，使得我国对虾野生资源面临种质衰退 为现实，为此，人们开始应用PCR技术扩增I11tDNA 的危险，对其遗传种质和种群遗传结构进行研究成 的某一基因片段 ，分析其序列多态性(Palumbi等， 为 目前的当务之急。 1991；Machado等，1993)。本研究首次测定了中国 获得种群遗传多态性的资料及建立种群遗传标 对虾16SrRNA基因序列，分析了我国近海不同种 记 ，无论是对于种质资源的保护还是加速选择育种 群的中国对虾 16SrRNA基因序列多态性，可为今 的进程均有重要的指导意义 。本世纪 70年代以来， 后渔业资源管理、种质资源保护和遗传选育提供分 同工酶电泳技术被广泛应用于对虾类种群遗传多态 子遗传学基础。 性研究 (Lester，1979；Mulley等，1980；Redfied等， 1 材料与方法 1981；Tam等，1993)。Hedgee~rk等(1982)综述了 65种十足类 甲壳动物同工酶 电泳资料，结果发现 1．1 样品采集 对虾类同工酶多态性位点的比率及平均杂合度均非 中国对虾标本于 1997年4～5月分别采 自烟台 常低，依靠同工酶差异无法建立对虾种群遗传标 (YT)、长岛 (∞ )、青岛 (QD)、宁波 (NH)，除 记，从而限制了该技术在对虾类种群遗传结构分析 宁波样品为养殖虾外，其余样品均为海捕虾。所有 上的应用。近年来 ，随着分子生物学技术的发展， 活体标本浸泡于80％～l00％的酒精中于4℃冰箱 出现了一系列新的分子标记技术 ，如限制性片段长 保存备用。 度多态