在猪链球菌2型江苏分离株中发现新or力相关基因术r2毒.pdfVIP

壅些生 垫 堂塑 umlofAgriculturalBiotechnology 2003，11(3)：295～298 · 研究论文 · 在猪链球菌 2型江苏分离株中发现新的orr2毒力相关基因术 李干武 姚火春 陆承平 料 (南京农 大学动物医学院，南京 210095) 摘要 ：根据文献报道的猪链球菌 (Streptococcussuis)2型一种新 的毒力基 因相关序列，设计和合成 ．计引物，以猪链球 菌2型江苏分离株 HA980l的DNA为模板 ，扩增推导的毒力基 因的完整阅读框 ，并定 向克隆到质粒载体 pET一32a(+)中，经 测序表明，与国外推测的毒力基因完全同源。此外，以猪链球菌和其它链球菌猪源的国内分离株的基 组 DNA为模板 ，通过 PCR技术 ，检测这一推测毒力基因的出现率。该基因在猪链球菌2型的阳性率为 7／8，存其它猪源链球菌的阳性率为 9／23，在猪 源链球菌的总检出率为 51．6％(163／1)。 关键词：猪链球菌 2型；新毒力相关序列基 冈 DetectionofaNew VirulenceAssociatedGeneinStreptococcussuis Type2JiangsuIsolate LiGanwu YaoHuochun LuChengping (CollegeofVeterinaryMedicine，NanjingAgricultureUniversity，Jiangsu210095，China) Ab—l|睫 Srteptococcussuistype2isanimportantpathogenforpigand human． Ithasdifferentvirulencefactorsincluding muramidase—releasedprotein (MRP)，extracellularfactor(EF)，suilysinandcapsularpolysaccharide．SmithHEetal(2001)had successfullydetectedanew viur lenceassociatedsequenceoff2byusingthem ethod invivocomplem entation． Itwasinterestingto investigatethenew oft2 in swinestreptococcalstrainsisolated inChina． Theresultsshowed thatthenew oft2wasdetected from genomicDNA ofSrteptococcussuistype2JiangsuisolateHA9801bypolymerasechainreaction (PCR) techniqueandthePCR productrfom isolateHA9801waschonedintoplasmidvectorpET一32a (+) viarestrictionendonucleaseBarnH IandHind11I．The recombinantfragmentwas verifed by restriction endonuclease na alysisand sequenced． The nucleotide sequencewas 100％ homologicaltothatofthenew hypotheticalviur lenceassolatedsequenceort2reportedbySmithH E． Bythesamemehtod． htisoft2 wasalsodetectedrfom genom icDNA ofStreptococcussuistpy e2strainsandothersrteptococcalisolatesrfom swineinChnia．7／8of Srteptococcussuistype2 isolatesand9／23of