眼睑基底细胞癌组织中p21wAnC基因表达的研究.pdfVIP

维普资讯 Jouma10fMathematica1Medicine Vo1．21 No．1 2oo8 文章编号：1004-4337(2008)01-0036-03 中图分类号：R349．2 文献标识码：A ·基础医学研究 · 眼睑基底细胞癌组织中p21wAn／C 基因表达的研究 陈华新# 张端莲 李培安 (武汉大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系 武汉43OO71) 摘 要： 目的：探讨眼睑基底细胞癌组织中p21Wm C／~基因的表达。方法：收集武汉大学人民医院病理科 1999~2oo6年收集 的手术切除及活检的基底细胞癌(basalce1]carcinoma，BCC)标本共 40例，另取癌周围组织 5例作对照。基底细胞癌发病年龄2O～ 68岁。根据细胞分化程度，将BCC分为分化型(角化型、囊样型、腺样型)和未分化型(实体型、色素型、浅表型、硬化型)，其中Ⅸ 分 化型22例，未分化型l8例。将基底细胞癌和正常组做免疫组织化学染色，观察各组细胞内p21wAF／ 基因表达的变化。利用 HPIAS-2000图像分析系统测定p21WA~C／lm基因在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：基底细胞癌组织中 p21w胴 ／c帆基因呈低表达，癌旁组织中p21Wm ／C~基因呈高表达。图像分析结果显示，基底细胞癌组织与癌旁组织之间p21wAF1Am 基因的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义 (P0．01)。结论：p2】w胴 ／ 基因在肿瘤的发生发展中起了重要的作用。 关键词： 眼睑；基底细胞癌；p2lWm／Cm~基因 眼睑基底细胞癌 (basalcellcarcinoma，B()是眼睑恶性 生物技术有限公司)；超敏即用型S-P通用型免疫组织化学试 肿瘤中最常见的一种，虽然其发病缓慢，恶性程度和转移性较 剂盒(福州迈新生物有限公司)；显色试盒及多聚赖氨酸(北京 低，但发病人数的逐年增多，已引起人们高度重视。研究显 中山生物技术有限公司)。 示，多种癌基因的异常表达在眼睑BCC的发生发展过程中有 1．1．3 主要仪器 YwY781型医用微波仪 (250W，50Hz)， 着重要作用。研究癌相关基因在BCC发生、发展及转移机制 浙江临安电子器材厂生产；家用高压锅。 中的作用，对于揭示 BCC的生物学行为与探索有效的防治方 1．2 方法 法具有重要意义。 1．2．1 常规HE染色 取材、固定、脱水、透明、切片和HE p21wAFc／矾基因是 目前已知具有最广泛活性的细胞周期 染色。 ‘ 抑制基因，参与了细胞增殖、分化、衰老、凋亡 以及DNA损伤 1．2．2 免疫组织化学 S-P法检测 p21抗原 主要步骤：组织 修复等多种功能的调节。目前普遍认为肿瘤是一种以细胞周 切片5 ，常规脱蜡至水，蒸馏水洗；3 过氧化氢，37℃孵育 期失调为特征的疾病，众多研究已证实细胞周期抑制基因 10min以抑制内源性过氧化物酶活性，PBS洗4×5rainp21 pZlWm／C~基因与肿瘤的发生发展密切相关[1]。 采用微波抗原修复(3档，10min)，PBS洗 4×5mira正常羊血 清 37C孵育10min以减少非特异性反应；一抗37℃孵育1h， 1 材料与方法 PBS洗4×5mira生物素标记的二抗，37℃孵育10rain，PBS洗 本实验采用免疫组织化学方法观察了p21w 矾基因在 4×5min；链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶复合物37℃孵育 眼睑基底细胞癌组织中的表达，探讨pZ1wni／矾在眼睑基底细 10min，PBS洗 4×5r