绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅰ基因的定点突变及酶学性质的研究.pdfVIP

维普资讯 72 ． j= 。 A B盈sc羔。。 2J0u0n8e年，。2600月8 文章编号：1008—3464(2008)增一0001—07 绿色木霉葡聚糖 内切酶 I基因的定点突变及 酶学性质的研究 陈祺 ，韦宇拓 ，杜丽琴 ，黄艳燕 ，黄 日波 (1 广西大学 生命科学与技术学院，广西 南宁 530005；2 广西科学院，广西 南宁 530004) 摘要：将绿色木霉葡聚糖 内切酶 EGI基因egl亚克隆到表达载体 pSE380，构建出重组质粒 pSE380一 egl，转化到大肠杆 菌 JM109中表达 ，利用 金属亲和层 析对 EGI进行纯化 ，纯化后 的酶 比活力达 到 3．8U／mg，其最适反应温度为48℃，最适 pH为 5．2。同时对 EGI的氨基酸残基 G291位进行随机定点突 变，筛选到一株突变