培养基不同浓度NaCl对花生离体培养影响.pdfVIP

花生学报2003，32(增刊)；315∞18 Jj㈣日J0，Pe觚叫S渤cc，V01．32，sup，2003 一———————————一———————————————————————————————————一—一 文章编号：1002_4093(2003)增刊一0315-04 培养基不同浓度NaCl对花生离体培养的影响+ 刘风珍1，万勇善2 (山东农业大学农学院，山东泰安271018) 摘要：培养基附加不同浓度的№a，观察对花生叶片愈伤组甥诱导，愈伤组织继代培养及不定根 诱导培养阶段的影响。叶片诱导脱分化时，完全抑制叶片脱分化的临界浓度品种问差异显著，海花 1号表现较强的耐盐性。海花1号在不同组培阶段的敏感浓度不同，叶片愈伤诱导显著受抑制临 界浓度为8g，L、完全被抑制的浓度是18g『L：愈伤组织生长显著受抑制的临界浓度为4酊一、完全 被抑制的浓度是10咖；不定根诱导显著受抑制的临界浓度为6g几、完全被抑制的浓度是8g几。 关键词：花生；组织培莽{抗盐；抗性：Nacl 中闰分类号：S565．203．4 文献标识码：A 绝大多数作物品种对盐是敏感的，培育耐盐品种是农作物适应盐渍土壤，提高产量的重 要途径n，≈。实践证明，通过常规育种方法选育耐盐品种，有很大难度翻。以NaCl为选择压，利 用组织培养技术筛选抗盐突变体，是一条效率较高的筛选鉴定方法，一些作物的研究已有较 大进展，为植物抗盐育种提供了重要手段f4】。花生组织培养方法筛选鉴定耐盐性的研究甚少， 本研究初步探讨了该途径的可行性，研究了组培阶段不同品种对Nacl敏感程度的差异，以及 对NaCl敏感的临界浓度。为利用组织培养技术进行花生抗盐性鉴定及体细胞突变体的选择 奠定基础。 1材料与方法 用花生主栽品种海花1号、鲁花11号、农大042和鲁花12号作为试验材料。成熟种子播 种在已消毒砂盒中，28℃培养发芽，l周后取主茎来展开小叶片，接种在Ms+ 4m虮且A十1mg，LNAA培养基上，诱导形成愈伤组织；愈伤组织接种于MS+3m虮凰A十1mg，L NAA培养基上继代培养：从发芽2周的幼苗上，取茎尖(带l片采展开叶)接种在Ms+o． 1m啦NAA培养基上诱导不定根。在26．5℃恒温下光照培养。 上述3种培养基分别附加不同浓度的NaCl作为处理。Nacl浓度梯度为0、2、4、6、8、 10、12、14、16、189几，每个处理接种的外植体数为30，重复3次。 2结果与分析 ·收稿日期：2003．09．03 基金项目：“十五”国家重点科技攻关计划项目(200lBA5儿B11) 作者简介：刘风珍(1966一)，女，山东东阿人，山东农业大学副教授，硕士研究生导师，在读博士，主要从事花生生物技术 研究。 万方数据 316 花生学报 32卷 2．1 培养基NacI浓度对不同花生品种叶片愈伤组织诱导的影响 花生小叶片接种在脱分化培养基上，3d时叶片变绿，体积增大：10d时伤口处已有明显可 见的黄白色愈伤组织；14d进行继代培养，28d时观察，未加NaCI处理出愈率均达到100％， 愈伤生长良好。培养基中添加109，LNaCl，能够完全抑制鲁花n号、农大042和鲁花12号3 个品种叶片脱分化：海花1号完全被抑制的Nacl浓度为18扎(表1)。 表1 培养基不同NacI浓度花生品种叶片出愈率(x) 培养基中添加不同浓度N8cl，对形成的愈伤组织的质量影响很大。鲁花1l号、农大042 和鲁花12号3品种，在Nacl浓度为2啦时，叶片形成的愈伤质量与对照相似，NacI浓度在 4饥。以上时叶片形成的愈伤较小为颗粒状或雪花状，浓度越高生长越差、雪花状愈伤的比例 越高；被抑制脱分化的叶片体积不增大、伤口处褐化、失绿黄化或褐化。在NaCl浓度为89几 以上时，海花l号形成愈伤的质量也明显下降，变化趋势与其他三品种一致。 2．2 Nac I胁迫对花生愈伤组织生长的影响