双歧杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠组织内肿瘤坏死因子α白细胞介素10与核因子κB表达的影响.pdfVIP

· · 582 双歧杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠组织内 O 肿瘤坏死因子一0【白细胞介素．1 和核因子一KB表达的影响 胡芳娥武爱斌 溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，uc)是炎症性肠病的一素抗凝，离心分离血清，按EusA试剂盒说明检测TNF一仪。 11．5 种，其发病率有明显上升的趋势，研究表明菌群失调是其发 1．6统计学处理：所得数据以；虹形式表示，采用sPSs 病的重要病因之一。双歧杆菌是目前公认的肠道益生菌．但 软件对所得数据进行方差分析，以PO．05为差异有统计学 补充双歧杆菌是否有益于uC的治疗。尚无相关研究。本文通 意义。 过给uC大鼠灌服双歧杆菌，并检测肿瘤坏死因子(tumor2结 果 necrosis factor，TNF)一仪、白细胞介素(incerleukin，IL)．10和核2．1各组大鼠肠管组织学观察结果：正常组大鼠肠黏膜完 转录因子(NF)．KB的表达变化，为UC的临床治疗提供理论整，肠腺排列整齐。uC组大鼠肠黏膜充血水肿，可见溃疡，腺 依据。 体破坏明显，固有层内大量淋巴细胞浸润。治疗组肠腺体排 1材料与方法 列较uc组规则+出现再生修复性改变，溃疡表面由新生的上 1．1材料和试剂：健康雄性SD大鼠30只，体质量100～150皮细胞覆盖，炎症细胞减少，黏膜下层和固有层纤维组织增 g，购自山西医科大学动物中心，随机分为正常对照组(n= 多。 10)、uc组(凡=10)和治疗组(，l=10)；葡聚糖硫酸钠(dextrance sulfate sodium，DSS)、TNF—d酶联免疫吸附试验(EusA)检测 试剂盒、兔抗大鼠白细胞介素(IL)．10、NF_KB单克隆抗体、辣计学意义(PO．05)。 根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔IgG抗体和二氨基联苯胺 (DAB)试剂盒均购自北京中杉生物有限公司；双歧杆菌由湖常对照组大鼠肠黏膜上皮细胞中呈水平高表达，在固有层和 南泰中南医药有限公司分离。 黏膜下层单核细胞中表达水平较低。在uc治疗组大鼠肠组 1．2模型制备：参照文献[1]进行模型制备：正常对照组：自织中表达水平显著降低，仅在固有层和黏膜下层单核细胞中 由饮用蒸馏水；uc组：大鼠自由饮用5％Dss溶液；治疗组：偶有表达，差异具有统计学意义(PO．05)。而在治疗组IL．10 每日自由饮用5％DSS溶液，同时灌服双歧杆菌(1×108ch埘)。 在肠黏膜上皮细胞中呈高水平表达，在固有层和黏膜下层单 造模14d后处死大鼠，解剖后评价大鼠结肠黏膜损伤指数 核细胞中表达水平较低．与正常对照组比较差异无统计学意 mucosal (colon damageindex，CMDI)[引，同时取部分大鼠结肠义(P0．05)。NF．KB在正常对照组大鼠肠黏膜上皮细胞及固 标本。每例标本制作切片15张(5张检测ILlO、5张检测NF—有层细胞的胞质和(或)胞核中仅呈弱阳性表达，在uC治疗 KB、3张进行组织学观察，2张作为空白对照)。 组大鼠结肠黏膜细胞及固有层单核细胞胞质和(或)胞核则 1．3组织学观察：石蜡切片常规脱蜡和水化后。进行苏木素一 呈强阳性表达。在治疗组大鼠肠黏膜上皮细胞及固有层细胞 伊红(HE)染色。 的胞质和(或)胞核中呈中等强度表达。3组比较差异具有统 1-4免疫组织化学SP法检测IL广10和NF．KB：切片常规脱计学意义(P0．05)，组间两两比较，差异具有统计学意义(P 蜡、水化、抗原修复后，分别滴加兔抗大鼠ILl0和NF．KB单0．05)。见表1。