水稻黑条矮缩病毒第九号基因片段的克隆与表达.pdfVIP

卷 期 ! 微 生 物 学 报 ’( )! .’ ) 年 月 #$$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,- #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 水稻黑条矮缩病毒第九号基因片段的克隆和表达 李春波 钟永旺 张旭东 魏春红 李 毅 （北京大学生命科学学院蛋白质工程和植物基因工程国家重点实验室 北大4耶鲁植物分子生物学及农业生物技术中心 北京 0$$/60） 摘 要：应用D54EFD 技术从表现玉米粗缩病症状的玉米叶片中分离克隆了水稻黑条矮缩病 毒（ ， ）的第九号片段 （ 登录号 ），并测 DB- G(8B@4HIJ-8@-A AK8JL MJ+H DNOP O3 Q-,N8,@ 172!$36% 定了全序列。将该片段的第一个开放读码框（ ）在原核表达载体 中进行了高效表 O340 ?:5#0A 达，表达产物进行 端氨基酸序列测定，与理论推测的序列完全一致。将表达产物纯化后制 . 备了抗体，经R-HI-J, G(’II,S 从感病玉米叶片中检测到了该蛋白。 关键词：水稻黑条矮缩病毒，基因组片段 ，原核表达， O3 R-HI-J, G(’II,S 中图分类号： ， 文献标识码： 文章编号： （ ） T6/% T33 U! 1 0$$%4%063 #$$ $4$$4$% 水稻黑条矮缩病毒（ ， ）在我国北方的冀、鲁、陕、 DB- G(8B@4HIJ-8@-A AK8JL MJ+H DNOP 晋、辽、津等省（市）区及南方的水稻产区均有分布，对我国主要农作物如水稻、小麦、玉米 ［］ 等均造成较大的危害0 。 水稻黑条矮缩病毒是呼肠孤病毒（ ）科，斐济病毒（ ）属的成员，同属 D-’MJA8- 7VMJ+H 的还有玉米粗缩病毒（ ， ）和斐济病毒（ ， ）。 W8X- J’+SY AK8JL MJ+H WDP 7V AH-8H- MJ+H 7P 它们的基因组均由 条双链 （ ， ）组成，主要由灰飞虱（ 0$ D.1 A’+G(-4HIJ8,A-A D.1 AHD.1 !#$ %’()* +,-.,’’/+ 0 ’’1 ）以持久方式传播。我国报道的水稻黑条矮缩病毒和玉米粗缩病毒 ［］ # 均能侵染水稻和玉米，这与国外的报道不一样 。已有的研究表明这两种病毒的基因组 ［］ 有较高的相似性 。目前关于水稻黑条矮缩病毒的分子生物学研究还很少，主要集中在 ［ ］ 病毒形态、生理生化、全基因组序