表遗传学修饰的研究方法新进展.pdfVIP

维普资讯 匾际遗传堂杂志2007年 12月15日第30卷第6期 |ntJGenetDec15．200／．v01。30．No．6 · 综 述 · 表遗传学修饰研究方法新进展 刘素晓 金帆 黄荷凤 【摘要】 表遗传学修饰重新编程通过DNA甲基化和组蛋白乙酰化等多种修饰方式，有序地改变 染色质构形、调整基因表达，在哺乳动物的生殖发育等过程中作用重要。近年来随着有关研究深入 ，各 种新技术、新思路不断涌现，研究方法得以不断改进和完善，该文就表遗传学修饰研究方法学的最新进 展作一综述。 【关键词】 表遗传学修饰；方法学；DNA甲基化；组蛋白共价修饰；染色质构形 AdvancesintheMethodologyofResearchinEpigeneticModification HUSu—xiao．jlN Fan ．HUANG ， (Worn,ca Hospital，SchoolofMedicine，ZhejiangUniversity，Hangzhou310006，China) Correspondingauthor：jINFan。E-mail：finfan@ u．educa A【bstraa] Byseveralmodificationstyles，suchasDNAmethylationandhistonecovalentmodifications， epigeneticreprogrammingwhichchangesinchromatinconfigurationorderlynadregulatesgeneexpressionisof greatimportancein mammalina reproductionand developmentnad otherprocesses．With hteadvnaceofthe research in thisfield，rgeatprorgesses in the methodology have been madein recentyears． Thisreview summarizeshtoseadvnacesinhtemethodologyofresear~hinepigeneticmod ification． K【eywords】 Epigeneticmodification； Mehtodology； DNA mehtylation； Histone covalent mndificatioils； Ch~matinconfiguration 在哺乳动物的生殖、发育或疾病的某些特殊时 白修饰对生物钟的调控便是组蛋 白乙酰化对基因表 期，细胞会通过染色质 DNA甲基化水平改变，组蛋 达调控最明显的例证 J。 白尾部修饰 (甲基化、乙酰化、磷酸化、ADP．核糖基 随着表遗传学修饰研究的深入，各种新技术和 化、泛素化等)，非组蛋白的结合，染色质重塑，有序 新思路的不断涌现，有关的方法学也以极大的改进 地调整基因表达，其过程不涉及 DNA碱基序列改 和完善，该文就表遗传学修饰研究方法学的最新进 变，称为表遗传修饰重新编程…。 展作一综述。 目前研究最为深入、同时也是 已知最为重要的 1 DNA 甲基化检测 表遗传修饰形式是 DNA 甲基化和组蛋 白乙酰化。 前者通过DNA特异区域 CpG岛胞嘧啶第 5位碳原 1．1 亚硫酸盐突变测序：亚硫酸氢钠能有效地使未 子与甲基的共价结合，成为5-甲基胞嘧啶，改变基因 甲基化的胞嘧啶脱氨基转换为尿嘧啶，但不影响5． 表达水平，决定基因印记和x染色体失活，并起稳定 甲基胞嘧啶。亚硫酸盐测序在提纯基因组DNA后， 基因、提供了对抗转座元件 的防御机制 J。后者 由 用亚硫酸氢盐处理，然后进行PCR扩增与测序，可 组蛋白乙酰基转移酶和去乙酰化酶共同调节，可影 分析特定区域每一个 CpG二核苷酸或组织特异性 响组蛋白与DNA双链的