番红花红T和牛血清白蛋白作用的光谱特性_张建刚.pdfVIP

第28 卷, 第 3 期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 8 , No . 3 2 0 1 1 年 5 月 Chinese Journal of Sp ectroscop y Laboratory May , 2 0 1 1 番红花红 与牛血清白蛋白作用的 T 光谱特性 a, b a a b 张建刚 　 卫艳丽　董 川 　张丽 a( 山西大学化学化工学院　太原市坞城路92 号　030006) b( 山西农业大学文理学院　山西省太谷市　030801) 　用荧光光谱法研究了番红花红T 与牛血清白蛋白( BSA) 的结合反应。结果显示番红花红T 对牛血清白蛋白的荧光有猝灭作用, 其猝灭类型属于静态猝灭; 得到了不同温度下的结合常数和结合位点 数; 利用V an ′t Hoff 方程计算得到该猝灭反应的热力学参数, 结果表明番红花红T 主要以静电作用力与 相互作用; 同步荧光光谱显示番红花红 对 构象产生了影响。 BSA T BSA 番红花红T ; 牛血清白蛋白; 荧光光谱法 : O657. 32: A : 1004-8138( 2011) 03-1355-05 1　引言 蛋白质是生物体中必不可少的生命物质, 在生命的运动和发展中起着重要的作用。血清白蛋白 是血浆中最为丰富的蛋白质, 能与许多内源及外源性化合物结合。进行小分子和蛋白质相互作用研 [ 1—5] 究, 可以从分子水平的角度认识蛋白质, 为生命科学及药物研究提供有用的信息 。番红花红T [ 6] 属于吩嗪类碱性染料, 在水溶液中以一价阳离子的形式存在, 多用于生物染色 , 本文依据番红花 红T 与牛血清白蛋白作用后的光谱特异性变化对番红花红T 和牛血清白蛋白的作用机理进行了 探讨, 得出了反应的结合常数、结合位点数、热力学参数等, 为医药学的发展和吩嗪类染料的研究提 供了重要的实验数据和理论依据。 2　实验部分 2. 1 日立F-4500 型荧光分光光度计( 日本日立公司) ; 石英亚沸高纯水蒸馏器( 江苏勤华玻璃仪器 厂) ; XS 系列电子天平( 瑞士普利赛斯国际贸易有限公司) ; pHS-2ST 数显酸度计( 上海天达仪器有 限公司) 。 番红花红T : 用水配成1×10- 3mol/ L 的溶液, 使用时适当稀释; 牛血清白蛋白( BSA, 天津川页 生化制品有限公司) : 配制 1. 0 ×10- 4 / 的储备溶液, 使用时适当稀释; 7. 4 的 - 缓冲溶 mol L pH B R 液: 在100mL 的三酸混合液( H3 BO3 , H3P O4 , HAc 浓度均为0. 04mol/ L) 中, 加入56. 3m L 的NaOH ( 0. 2mol/ L) ; 其余试剂均为分析纯; 所用溶液于4℃下保存。实验用水为二次去离子水。 国家自然科学基金( No. ; 山西省青年科技基金( No. 2010021010-2) 联系人, 手机: ( 0) E-mail:zjgz 139@ ohu. com; dc@ xu .edu. cn 作者简介: 张建刚( 1978—) , , 山西省平遥县人, 在读博士, 主要从事分析化学的教学与研究工作。 收稿日期: 2010-12-09; 接受日期: 2010-12-30 1356 光谱实验