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项目2：微生物发酵技术 任务2：工业培养基制备与灭菌 教学安排： 1. 员工培训 由老师讲解工业培养基理论基础。 分配实操任务：工业培养基的制备与灭菌。 2. 学生模拟组建运营一个培养基车间，撰写计划书(在理论教学期间完成)。 市场部：当前工业培养基的发展特点，培养基灭菌方法的技术进展。 技术部：确定工业培养基制备的技术路线，撰写操作规程。 品控部：制定工业培养基质量标准及检测方法。 总经理：协调监督各部工作，最后拿出完整的计划书。 3. 计划书实施。 计划书要先经过老师的审核，然后实施。 实施过程中考核操作技能。 实施后及时进行实训报告的撰写也总结。 一 培养基组成 1 培养基配方组成：组成成分、各组成成分的浓度、合适的pH； 2 培养基随微生物的生理与产物不同而不同； 3 培养基成分： (1)碳源：葡萄糖、淀粉； (2)氮源：碳酸铵、玉米浆； (3)无机盐和微量元素； (4)前体和诱导物。 二 培养基组成影响细胞分化和产物形成 细胞分化：细胞形态、生理功能和化学组成上彼此不同； 培养基组成影响细胞分化： 二价阳离子、阴离子聚合物、表面活性剂、固形物含量、各成分的浓度、培养液的pH。 例： 在碱性培养基中产黄青霉易形成球状体； 二价阳离子诱发细胞呈球形； 无素锰可通过改变黑曲霉菌细胞壁的成分； 生物素和青霉素能改变细胞膜的成分。 　 三 配制工业发酵培养基的一般要求 (1)组成丰富，浓度适当； (2)各成分之间彼此不反应； (3)粘度适当，具有适当的渗透压； (4)成分要有利于主产物的合成，不利于副产物的合成； (5)即不影响通气与搅拌，又不影响或稍微影响产物的分离精制和废物处理； (6)因地制宜，质优价廉，成本低。 第二节 培养基的成分　 一 碳源 碳源：构成微生物细胞和代谢产物； 能源。 (一)糖类 单糖、双糖、多糖、淀粉质类和糖蜜； (二)脂肪 利用油脂增加微生物需氧量，产酸，降pH；要注意贮藏油脂，防止产生过氧化物。 (三)有机酸和醇； (四)碳氢化合物； 二 氮源 构成细胞成分，亦可作碳源使用。 (一)无机氮源的特点 1 成分单一，质量较稳定； 2 易被菌体吸收利用； 3 改变培养液的pH。 生理酸性物质与生理碱性物质。 (二)有机氮源的特点 1 成分比较复杂； 2 被菌体利用的速度不同； 速效氮源：玉米浆； 迟效氮源：黄豆饼粉和花生饼粉。 3 微生物对氨基酸的利用有选择性； 部分氨基酸即可用于菌体生长，亦可用于次级代谢产物的合成。 4 是引起发酵水平波动的主要因素。 常用有机氮源：黄豆饼粉、棉籽饼粉、麸质粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉等。 三 无机盐和微量元素 许多金属离子低浓度呈刺激作用，高浓度呈抑制作用。 1 磷 (1)组成生物大分子：核酸、核蛋白； (2)作为缓冲液调节pH； (3)对某些次级代谢产物有抑制作用。 常用磷酸盐：磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及其钠盐。 2 硫 构成细胞生物分子。 常用化合物：硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵、硫代硫酸钠。 3 铁 是细胞色素C、细胞色素氧化酶和过氧化酶的组成元素，同时对许多产物合成有抑制作用。 常用化合物：硫酸铁。 4 锌、镁、钴 锌对部分抗生素合成有促进作用及操作菌体生长，过量则抑制。常用化合物：硫酸锌； 镁激活一些酶，能提高一些菌体对本身所产抗生素的耐受性。常用化合物：硫酸镁； 钴是维生素B12的元素之一。常用化合物：氯化钴。 5 钠、钾、钙 钠：细胞质细胞渗透压； 钾：影响细胞膜透性； 钙：调节细胞膜透性，控制pH。 四 水 功能： (1)溶剂与运输介质； (2)参与生化反应； (3)维持生物大分子稳定性； (4)传递热； (5)维持细胞形态； (6)控制酶的活性。 水的活度。 五 前体 在产物的生物合成过程，被菌体用于产物合成而自身结构无显著改变的物质。 内源性前体和外源性前体。 六 消泡剂 植物油、动物油和一些化学合成的高分子化合物。 七 其他成分 生长因子与诱导物。 第三节 培养基的种类与选择 一 培养基的种类 1 按培养基的组成分为合成培养基和复合培养基 合成培养基：由已知组成成分的各种营养物质组合的培养基； 复合培养基：由一些组成成分不完全明确的天然产