硅胶表面牛血清白蛋白分子印迹聚合物的制备与分子识别性能.pdfVIP

第 34 卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 11期 　　　 　　　　　　　　 　　　 　　　　　　　　 2006年 11月 Ch inese Journal of A nalytical Chem istry 1551～1554 硅胶表面牛血清白蛋白分子印迹聚合物的制备 及分子识别性能 1, 3 1 2 周艳梅 　徐文国 　童爱军 1 ( ) 2 ( ) 北京理工大学理学院 ,北京 100081 　　 清华大学化学系 ,北京 100084 3 (河南大学化学化工学院 ,开封 47500 1) 摘 　要 　报道了以氨丙基硅胶为载体 ,将其表面醛基化后通过亚胺键共价键合牛血清 白蛋白,再用两种硅烷 化试剂氨丙基三乙氧基硅烷和正辛基三 甲氧基硅烷进行聚合 ,合成表面印迹牛血清 白蛋白分子印迹聚合物 的方法 。本方法以共价键印迹蛋白质 ,用草酸洗脱 。表面印迹有利于大分子蛋白质向印迹位点的扩散和再结 合 ,合成的印迹聚合物对牛血清白蛋白的吸附率达 44. 5% ,而其它蛋白的吸附率小于 17% ,显示对模板蛋白 具有特异吸附能力 。 关键词 　表面分子印迹 , 共价键合 ,硅胶 ,牛血清白蛋白 1　引　　言 分子印迹聚合物对模板分子的立体结构具有 “记忆 ”功能 ,从而对模板表现出高度选择性识别能 力 。依据功能单体和模板分子的作用机理不同 ,分子印迹可分为共价印迹和非共价印迹两大类 。前者 是模板分子与功能单体先通过共价键结合继而进一步聚合进行印迹的方法 ;而后一种方法是基于模板 π 分子与功能单体之间通过氢键 、离子键 、 堆积 、范德华力等形成预组织化合物 ,在此基础上进一步聚合 得到印迹聚合物 。鉴于分子印迹聚合物对模板的选择性识别能力 ,其作为分离富集材料和传感器的敏 感元件以及催化剂等在诸多分析领域的应用前景一直备受关注 [ 1 ] 。然而迄今为止 ,有关分子印迹技术 的研究大多停留在小分子的印迹上 ,人们在氨基酸 [ 2 , 3 ] 、金属离子 [ 4 ] 、小分子药物 [ 5 ] 等为模板的分子印 迹研究中已经取得长足进步 。而对于生物大分子 ,如蛋白质的分子印迹研究还较少有成功的范例 [ 6～8 ] 。 其原因是生物大分子结构复杂 ,容易变性失活 ,分子印迹存在诸多困难 。 目前文献中已经报道的蛋白质分子的印迹方式有包埋法 、表面印迹和抗原决定基法 [ 9 ] 。其中表面 印迹法是通过对载体粒子进行表面修饰制备分子印迹聚合物 ,其印迹位点存在于粒子的表面或接近表 面 [ 10 ] ,有利于蛋白质向印迹孔穴扩散 ,传质速度快 ,结合效率高 ,而且往往具有足够的热稳定性和机械 强度 ,是一种理想的蛋白质印迹的方法 [ 11 ] 。 本研究报道了一种合成表面印迹牛血清白蛋白的印迹聚合物的新方法 [ 11 ] 。以氨丙基硅胶为载体 , 将其表面醛基化后 ,通过亚胺键共价键合牛血清白蛋白;再用两种硅烷化试剂氨丙基三乙氧基硅烷和正 辛基三甲氧基硅烷进行聚合 ,得到牛血清白蛋白表面印迹硅胶聚合物 。以扫描电镜和红外光谱对聚合 物进行表征 。用本方法合成的分子印迹聚合物对模板蛋白质显示出选择性吸附能力 。 2　实验部分 2. 1　仪器与试剂 JA SCO V 550 型紫外 可见分光光度计 ; Perk in E lm er SPECTRUM 1000 型 FTIR 光谱仪 ; KYKY2800 ( ) ( ) 扫描电子显微镜 ; THZ82 型恒温振荡器 上海跃进医疗器械厂 ;