细胞生物学自打.docVIP

细胞核组成：核被膜、核纤层、染色质、核仁、及核体 核被膜结构组成：内外核膜、核纤层、核孔、核周空间 核被膜功能：核质之间的天然选择性屏障，避免生命活动的彼此干扰，保护DNA不受细胞骨架运动所产生的机械力损伤，基因表达的的空隔离；调控核质之间的物质交换和信息交流 核被膜解体与重建的要点：新核膜来自旧核膜；核被膜的去组装时非随机的，具有区域特异性；以非洲爪蟾卵提取物为基础的非细胞核组装体系提供了实验模型；核被膜的解体与重建的动态变化受细胞周期调控因子的调节，调节作用可能与核纤层蛋白、核孔复合体的磷酸化与去磷酸化修饰有关。 核孔复合体的结构：胞质环（外环）、核质环（内环）、辐（柱状亚单位、腔内亚单位、环带亚单位）、中央栓。成分——gp210（结构性跨膜蛋白，介导核孔复合体与核被膜的连接，将核孔复合体锚定在孔膜区，从而为核孔复合体组装提供一个起始位点；在内外核膜融合形成核孔中起重要作用；在核孔复合体的核质交换功能活动中起一定作用）、p62（功能性的，具有俩个功能结构域，疏水性N端：可能在核孔复合体功能活动中直接参与核质交换；C端区：可能通过与其他核孔复合体蛋白相互作用，从而将p62分子稳定到核孔复合体上，为其N端进行核质交换活动提供支持。） 核孔复合体的功能：核质交换的双向性亲水通道（输出与输入，主动与被动）；通过核孔复合体的主动运输（选择性表现：对运输颗粒大小限制、是一个信号识别与载体介导的过程，需要消耗能量，表现出饱和动力学特征，双向性）； 核蛋白：指在细胞质中合成，然后运到核内起作用的一类蛋白质。核定为信号（NLS）：另一种形式的信号肽，可以位于多肽序列的任何部分，没有专一性，帮助亲核蛋白进入细胞核指导输入后不切除，是亲核蛋白入核必要不充分条件。 亲核蛋白入核：结合（需NLS识别并结合入核蛋白）；转运（需GTP提供能量） 染色质：间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构，是间期细胞遗传物质存在的形式。 基因组：凡具有细胞形态的生物其遗传物质都是DNA，在真核细胞中，每条未复制的染色体包装一条DNA分子，一个生物贮存在单倍染色体组中的总遗传信息。分为编码序列和调控序列。 DNA分子一级结构多样性：非重复序列DNA；中度重复DNA序列（短散在重复元件、长散在重复元件、可移动，影响基因表达）；高度重复DNA序列（卫星DNA、小卫星DNA，个体鉴定、微卫星DNA，遗传上高度保守，高度多态性） DNA分子二级结构：B型（右手双螺旋，活性最高）A型（右手，B型变构形式）Z（左手，B型变构形式） DNA构型生物学意义：沟（特别是大沟特征在遗传信息表达过程中起关键作用）；沟的宽度及深浅影响调控蛋白对DNA信息的识别；三种构型的DNA处于动态转变之中；DNA、二级结构的变化与高级结构的变化是相互关联的，这种变化在其复制与转录中具有重要的生物学意义。 染色体蛋白：负责DNA分子遗传信息的组织、复制和阅读。包括组蛋白与非组蛋白。 组蛋白：是构成真核生物染色体的基本结构蛋白，富含带正电荷的精氨酸和赖氨酸，是碱性蛋白，可以和酸性的DNA紧密相连，由化学修饰（乙酰化、磷酸化、甲基化、核糖化）分为核小体组蛋白和H1组蛋白；核小体组蛋白分四种，帮助DNA卷曲成核小体稳定结构。H1在构成核小体时起连接作用，赋予染色质以极性。 非组蛋白：有多样性和异质性，对DNA有识别特异性，具有多种功能，包括基因表达的调控和染色质高级结构的形成（参与染色体的构建；启动基因的复制；调控基因的转录）。 反式作用因子：参与基因表达调控的因子，他们与特异的靶基因的顺式元件结合起作用。顺式作用元件：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。包括启动子、增强子、负调控序列和可诱导元件。 证实核小体：铺展染色质的电镜观察；用非特异性微球菌核酸酶消化；应用X射线、中子散射和电镜三维重建技术；SV40微小染色体分析。 核小体结构要点：每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H1；组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心颗粒，相对分子质量100*1000，由4个异二聚体组成，包括两个H2A.H2B和两个H3.H4；146bp的DNA分子超螺旋盘旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈。组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bpDNA，锁住核小体DNA的进出端，起稳定核小体的作用；两个相邻核小体之间以连接DNA相连，典型长度60bp，不同物种变化值在0~80bp不等；组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的，基本不依赖于核苷酸的特异序列；核小体沿DNA的定位不受不同因素的影响 染色体组装的两种模型：多级螺旋模型（DNA→核小体→螺线管→超螺线管→染色单体）、骨架-放射环结构模型（非组蛋白构成染色体骨架和由骨架伸出的无数DNA侧环；30nm的染色线折叠