浅谈HPLC法测定有关物质时已知杂质计算方法.pdfVIP

·方法学研究· 浅谈HPLC法测定有关物质时已知杂质的计算方法 余振喜，庾莉菊，黄海伟，张启明(中国药品生物制品检定所，北京1000so) 中图分类号：R921．2 文献标识码：A 文章编号：1009—3656(2010)一4—278—5 Discussiononthe MethodsoftheKnown inRelatedSubstancesDeter- Calculation Impurities minedHPLC by Yu theControl and Zhen—xi，Yu“-ju，HuangHai-wei，ZhangQi—ming(NationalInstitutefor ofPha删icalBiologicoZProducts，Bei- ∥昭100050) 药品注册的国际技术要求(ICH)指出原料药中同的意义及其优缺点，下面参考国内外药品标准和 的杂质是指存在于原料药中，但其化学结构与原料 相关期刊文献，结合在药品检验中的实际工作，对这 药不一样的任何一种成分；制剂中的杂质是指制剂 些计算方法作一简单探讨，以期为药品质量标准的 中除了原料药或赋形剂以外的其他任何成分…。 建立或进行相关研究时对有关物质检查中已知杂质 根据ICH中杂质的含义，杂质分为有机杂质、无机 的计算方法的选择提供借鉴和参考。表1是各种计 杂质和残留溶剂。有关物质是杂质的一种，主要是 算方法的计算公式及其主要优缺点。 指有机杂质，它可能是原料药合成过程中带入的原 1面积归一化法 料药前体、中间体、试剂、分解物、副产物、聚合体、异 面积归一化法具有与称样量及进样量基本不相 构体以及不同晶型、旋光异构的物质，也可能是制剂 关的特点，因此重复性和重现性均良好，不需要折 过程或是在贮藏、运输、使用过程中产生的降解 算，降低了实验中对称样量精密度的要求，降低了检 物[2-3]。有关物质的检查方法很多，目前主要有薄层验成本，操作更加简便、快捷，省去了计算过程剖。 但需要强调的是面积归一化法是在假设所有成分均 色谱法(TLC)、液相色谱法(HPLC)、气相色谱法 (GC)、紫外分光光度法(uV)及容量分析法等。而出峰、所有杂质均与主成分分离并且所有杂质均与 其中的HPLC法具有专属性强、分离效果好、灵敏度主成分响应因子相同的前提下，只有在这种假设的 高、分析速度快、重复性好、操作简便等诸多优点，且 前提下，计算出的结果才可能完全真实地反映该杂 能与多种类型检测器联合应用，能满足大多数化合 质在样品中的比例。可这毕竟只是假设，实际情况 物种类的检测需要，比较符合有关物质检查时杂质 可能并非如此。另外当杂质是微量的时候需增加方 含量低、种类多的特点【2引。随着液相色谱技术的进 法的灵敏度，就要增加进样量，此时主成分可能超出 一步完善，新型检测器的不断开发，以及各种类型检 仪器检测范围，或虽然在仪器检测范围内，理论上讲 测器的联合应用，HPLC将在有关物质检查中发挥此时可能与主成分不在同一线性范围内，为防止此 更大的作用。 种情况的出现，才引入了“不加校正因子的主成分 根据ICH要求，无论是原料还是制剂，只要是 自身对照法”【7】。正是由于各杂质的响应因子不 其中实际存在的、含量大于给定鉴定阈值的杂质都 同、含量较低和需要较宽的线性范围等因素的影响， 要进行鉴定…。根据这一要求，药品中的一部分杂 《中国药典zoos年版二部附录中特别强调“本法通 质应该是已知杂质。HPLC法测定有关物质中已知常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有 杂质的测定方法很多，计算方法也相应很多，虽然某 规定外，一般不宜用于微量杂质的检查”【9J，这也在 一药品中某一杂质的实际含量是一定的，但不同的