β甘露聚糖酶对断乳仔猪肠道菌群多态性影响.pdfVIP

andFeedstuffs 2009年第45卷第23期 蕾蓠圃戤·Nutrition 卢一甘露聚糖酶对断乳仔猪肠道 菌群多态性的影响 李学俭，潘树德，边连全’，张 飞，刘显军 (沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳 110161) 摘要：研究选取72头健康的(28±2)日龄社X长X大三元杂交断乳仔猪，体重平均为(7．8±0．69)妇，按公、母 各半的原则随机分为4组，每组3个重复，组1、组2、组3、组4在饲喂基础日粮的基础上分别添加口一甘露聚糖酶 o、0．025％、0．05％、0．1％，试验期28d。分别于试验第14、28天早、中、晚收集每重复组新鲜粪便，混合均匀后取50g 迅速放置一20℃下保存，以供DNA提取，然后采用PCR—DGGE法研究肛甘露聚糖酶对断乳仔猪粪便茵群多态 性的影响。结果表明：断乳仔猪日粮中添加一定剂量的争甘露聚糖酶，可以增加DGGE图谱的条带数和多样性参 数(H’)。从而缓解了早期断乳应激所造成的仔猪肠道细菌种类和数量的减少。 关键词：口一甘露聚糖酶；肠道茵群多态性；断乳仔猪 中图分类号：$828．5 文献标识码：B 随着分子生物学的迅速发展，无需进行细菌培 长×大三元杂交断乳仔猪，体重平均为(7．8±0．69)kg， 养的16SrDNA分子生物学技术促进了微生态研究按公、母各半的原则随机分为4组，每组3个重复， 的发展。特别是被称为DNA指纹技术的变性梯度凝 每个重复6头猪，组1为对照组，组2、组3、组4在 胶电泳法(DGGE)能有效分析复杂微生物群落及其饲喂基础日粮中分别添加肛甘露聚糖酶0．025％、 多样性，其基本原理是长度相同而碱基组成不同的 0．05％、0．1％，为期28d。 DNA序列在不同条件下变性，在变性梯度凝胶电泳 制，由沈阳众友饲料公司提供：玉米59．8％，豆粕 上特定位置形成泳带。Muyzer等111首次将该技术用 于分析土壤环境的微生物区系后，已迅速被用于其 21％，鱼粉5％，乳清粉6％，大豆油2．15％，石粉 他环境微生态以及人和动物肠道微生态的研究，并 0．8％，磷酸氢钙1％，食盐0．25％，预混料4％；营养 且在研究瘤胃细菌多样性、仔猪肠道细菌区系等过 成分为消化能13．79 MJg，粗蛋白20％，钙0．9％，磷 程中日趋完善。 0．66％，赖氨酸1．35％。试验期间按沈阳农业大学科 口-甘露聚糖酶对断乳仔猪肠道菌群微生态的研 研种猪场常规方法进行疫苗注射和饲养管理。 究在国内尚属空白，本试验为了迸一步阐明争甘露 1．5样品收集于试验第14、28天早、中、晚喂料 聚糖酶影响肠道细菌菌群的全貌，采用PCR—DGGE和冲栏后，分别用灭菌的塑料烧杯收集各重复的新 研究肛甘露聚糖酶对断乳仔猪粪便菌群多态性的 鲜粪便，混合均匀后，取50 mL离心管 g于灭菌的5 影响，为口一甘露聚糖酶在养殖业中的应用提供理论 中，迅速放置液氮灌保存以供DNA提取和 依据。 PCR—DGGE分析。 1．6粪样总DNA的提取与检测采用苯酚一氯仿一 1材料与方法 异戊醇抽提法提取。而后采用1％琼脂糖凝胶电泳 1．1 s-甘露聚糖酶由美国ChemGen(高锦)公司 限公司。 提供，活性为1．4×108酶活单位／kg(在指定温度、 s，