环境工程中微生物分析方法的研究进展.pdf

科技信息 职教与成教 环境工程巾微生物分析方法研奔进展 西安职业技术学院建筑工程系 马美玲 【擒要】本文阐述了环境-+-ga中常用的微生物分析方法原理及其应用，重点介绍了目前应用较多的聚合酶链式反应(PCK)、变性 生物分析方法的现状以及PCR—DGGE技术用于生物处理系统中微生物群落多样性和动态性研究的现状、前景和改进的策略。 【关键词】细菌培养检测PCR技术DGGE技术PCR—DGGE技术 生物处理方法已经成为环境1T程中废水、废气和固体废物处理的 现为分散的条带。这样不同环境样品，经过变性梯度凝胶电泳(DGGE) 最重要的方法之一。因此，利用微生物分析方法，研究环境1程生物处 就ur以分离出数日不等的电泳条带，且各个条带的信号强度和迁移位 理『：艺中微生物群落种群结构和动态性对F研究生化反应的机理、污 置不同，每个独立分离的DNA片段原理上可以代表一个微生物种属。 染物降解和转化途径具有非常重要的意义，并为优化工艺运行条件，提 电泳条带越多说明生物多样性越丰富；条带信号越强，表示该种属的数 高污染物处理效率提供理论依据。目前研究环境工程中微生物的方法 量越多，从而确定不同环境T程处理单元中所含有的微生物的种类和 有传统的细菌培养和现代的分子生物技术。 数量关系，得出其中微生物多样性的信息。 1、传统细菌培养检测方法 目前国内外PCR—DGGE技术的主要应用集中在：确定总的细菌群 细菌培养足，·种用人工方法使细菌生长繁殖的技术，即将其接种 落或独特种群的遗传多样性o‘；可以检测出非常微肇的微生物种类，分 于培养基上生长繁殖．培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。进行细 析群落多样性，研究群落动态；监测细菌的富集和分离等”I。 菌培养时应根据细菌种类和日的等选择培养方法、培养基，制定培养条 PCR—DGGE技术以其快速、灵敏的优点，在环境、医学、卫生、制药 件(温度、pH值、时问，对氧的需求与否等)。从计数原理L分．细菌培养等许多领域得到广泛的应用。 的微生物检测方法大致口r以分为两类：平板计数法和多管发酵法。 3、分析与总结 1．1平板计数法及其应用 3．1细菌培养方法优势与不足 平板计数法是细菌培养最常用的方法，它是根据微生物在固体培 细菌培养作为最为传统的微生物鉴定方法．经过近百年的补充和 养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的，也 改进，细菌培养的技术方法已经非常成熟，仍然在医药、卫生、环境等各 就是说一·个菌落即代表一个荤细胞。这种计数法的优点是能测出样品 个领域广泛应用：但由f受到微生物可培养件的限制，目前只有极少部 中的活菌数．且操作简便、检测准确性好，因而得到广泛应用：此法常用 分微生物能够被分离和纯化，同时采用分离培养的方法进行检测，不仅 于某些成品检定(如杀虫菌剂)、生物制品检定以及食品、水源的污染程 费时(一般需几天到数周)．而且无法检测一些难以人工培养的病原菌， 度的检定等。 因此在应用中受到一定的限制一但因为细菌培养方法价格低廉、操作简 1．2多管发酵法(MPN)及其应用 单，目前在环境r程中还作为细菌的初步鉴定方法在使用。 多管发酵法．即MPN(mostnumber)法，是用统计数学方法 3．2分子生物技术方法优势与不足 probable 来计算水样中某中待测菌的含量的一种方法，适用于测定在一个混杂 分子生物技术方法有效地弥补了传统的微生物研究方法一显微镜 的微生物群落中虽不一定占优势，但却具有特殊生理功能的类群。其特 观察和分离培养，无法对群落结构进行动忿跟踪研究的缺陷。它从微生 点足利用待测微生物的特殊乍理功能的选择件来摆脱其他微生物类群 物种群结构动态变化的角度。揭示污染物负荷与污水处理系统的相互 的于扰。并通过该生理功能的表