拟康氏木霉液态发酵条件的研究.pdfVIP

菌物学报24(2)：235~244，2005 Mycosystema 拟康氏木霉液态发酵条件的研究 郝林华1 牛德庆1 陈靠山2，1+ 郭敏2 摘要：采用单因素和正交试验对筛选出的一株有潜力的生物防治菌——拟康氏木霉舭．jlD如硎口 筇P“如幻胛f疗硝的液态发酵条件进行优化，并进行100L发酵罐中试放大试验的研究。优化后的 0．5 拟康氏木霉发酵控制参数为：培养基配方为麸皮409／L，马铃薯50∥L，蔗糖20∥L，KH2P04 O．59／L，Cacl2 ∥L，Mgs04·7H20 0．259／L；摇瓶发酵培养时间为6d，培养基的初始pH值为6．O～ 7．0，发酵温度为28±1℃。通过对拟康氏木霉生长曲线的测定，确定其在发酵罐中培养的时间 60h为宜，此时所获得的菌丝体干重为1．2694∥100ml发酵液。本研究结果为高效率、低成本、 工业化生产具有生防作用的拟康氏木霉菌丝制剂提供了科学依据。 关键词：生物防治，培养条件优化，100L发酵罐中试，正交试验 中图分类号：Q939．97文献标识码：A 为了减少化学杀菌剂对环境的污染和在农产品中的残留，寻找对环境友好的新型植物病害 防治剂受到普遍重视。在已经研究的生防菌中，木霉属下的若干种因具有适应能力强、抗病谱 属最胗oc，．鲫子囊菌的无性阶段，对多种植物病原菌具有拮抗作用，被认为是极有希望的生物 防治因子。木霉对病原菌的作用机制是多种多样的，主要包括抗菌、溶解、竞争、重寄生等(蔡 定的木霉菌株来说，则又各具特点，防治效果也是各异的。另外，目前还发现木霉制剂除具有 能生防木霉菌株的筛选提出了新的指标。 课题组从玉米秸杆中筛选分离出一株具有很强生长势的木霉，经鉴定为拟康氏木霉 酶与木霉重寄生作用有关(李梅云等，2002)，而该菌在生物防治中的应用尚未见报道。课题 组通过体外拮抗试验，证明该菌具有极明显的竞争优势，能快速地占据生长空问、获取营养， 对灰葡萄孢霉、尖孢镰刀菌、番茄叶霉病菌、番茄早疫病菌、辣椒疫霉、辣椒炭疽菌等均有强 烈的抑制效应(郭敏等，个人通信)。该菌的代谢物可以显著降低番茄疫霉的病情指数，盆栽 接种试验表明对尖孢镰刀菌所致番茄枯萎病和灰葡萄孢霉所致番茄灰霉病均具有明显的防治 效果(郭敏等，个人通信)。利用该菌的发酵液对黄瓜枯萎病进行防效试验，表明对黄瓜枯萎 病病原菌有明显的拮抗作用，能显著降低黄瓜枯萎病菌的接种压力和病情指数(柳春燕等，个 基金项目：国家863计划资助项目(2002AA244031) 通讯作者，E—mail：ksc313@126．com 收原稿日期：2004一lO一11，收修改稿日期：2004．12．14 万方数据 236 菌物学报 24卷 人通信)。对黄瓜有关的生理指标测定结果表明，该菌发酵液100倍稀释后可以增强黄瓜叶片 可使其叶绿素含量提高约10％，且叶片较厚，具有一定的促生长作用(柳春燕等，个人通信)。 7～ 大棚防治试验结果也表明了该菌对番茄灰霉病良好的防治效果，当木霉孢子悬液浓度为10 示了该菌是一种非常有潜力的生物防治菌。将该菌与我们分离到的一株枯草芽孢杆菌(肋cff胁s sp．)的发酵液等量混合辅以其他成分复配成一种多功能生物制剂，用于盆栽和大田防治试验， 初步的研究结果表明该制剂能显著促进黄瓜、番茄、辣椒、茄子等蔬菜和棉花、小麦等经济作 物的生长和提高抗病能力，对多种植物病原菌有不同程度的防治作用。因此，有可能发展成为 一种纯生物的植物病害防治剂。 作为一类重要的自然资源，木霉已引起国内外研究者的广泛关注。因此，木霉的培养及发 酵条件是工业化大批量生产木霉菌制剂的前提。本文主要对我们筛选出的生防有效菌——拟康 氏木霉在摇瓶和发酵罐中的液体培养条件进行研究，其结果对于拟康氏木霉和多功能生物制剂 的工业化生产具有一定的指导意义。 1材料和方法 1．1供试菌株 Rifai，为本课题组筛选保存菌