安胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠TFF1和TGF-a+mRNA表达相关性研究.pdfVIP

摘要 目的: 探讨安胃汤对实验性慢性萎缩性胃炎大鼠模型的TFF1和TGF-a mRNA表达的影响。 方法: 采用甲基硝基亚硝基胍 （MNNG）慢性萎缩性胃炎大鼠模 型,48只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分为空白组、病理模型组、安胃汤组、胃复春对 照组共4组。实时荧光定量PCR方法观察安胃汤对实验性慢性萎缩性胃炎大鼠模型胃黏 膜TFF1和TGF-a mRNAmRNA表达的影响及与其相关性,对后者进行图像分析及统计学 处理。结果: 与病理模型组相比,安胃汤组和胃复春对照组均显著提高TFF1mRNA /ß-actin值 （0.86 ±0.13vs0.53 ±0.10,0.83±0.10vs0.54 ±0.10,P0.01 ）,安胃汤组优于胃复春 对照组 （P0.01 ）。 与病理模型组相比,安胃汤组和胃复春对照组均显著提高 TGF-amRNA /ß-actin相对表达量比值 （1.54±0.27 vs 0.78±0.08，1.30±0.15 vs 0.78±0.08， P0.01 ）,安胃汤组优于胃复春对照组 （1.54±0.27 vs 1.30±0.15 ，P0.05 ）。结论: 安胃 汤可能通过增加胃黏膜TFF1和TGF-a mRNA表达而起到治疗CAG作用，两者呈正相关。 关键词: 安胃汤;慢性萎缩性胃炎; TFF1; TGF-a ;实验研究 慢性萎缩性胃炎 （chronic atrophic gastritis, CAG）是常见消化病,与胃癌的发生密切 相关, 尤其是胃窦萎缩性胃炎与肠型胃癌的关系较为肯定, 世界卫生组织已将CAG定为 胃癌前状态, 因此对CAG的防治具有重要的意义。中药治疗可拓宽慢性胃炎的治疗途径 [1] 。 三叶肽家族(trefoil factor family,TFF)是由胃肠道黏液分泌上皮合成和分泌的一组具 有特定三叶结构域的小分子多肽,在哺乳动物中包括三个因子：乳腺癌相关肽 (TFF1/PS2)、解痉多肽(TFF2/SP)和肠三叶因子(TFF3/ITF) 。TFF具有很强的促进细胞增 [2] 殖与移行的能力,可促进受损区域上皮细胞重建并加快上皮细胞移行速度 转化生长因 。 子-a （transforming growth factor alpha ，TGF-a ）是作用于上皮细胞的重要生长因子之一, [3] 可促使细胞增殖和发生转化 。 安胃汤出自全国著名中医林沛湘教授治疗CAG的经验 [4] 方, 临床上疗效显著 , 但其作用机制尚未完全阐明, 我们通过动物实验观察其对胃黏 膜TFF1、TGF-a mRNA表达的影响, 探讨其防治CAG的作用机制。 1 材料和方法 1.1 材料 清洁级健康Wistar 大鼠,? ,体质量140- 170 g, 由广西食品药品检验所实验动物中心提供 （动物合格证号SCXX 桂2003-0001 ）。安胃汤为免煎中药颗粒,主要成分: 半夏、黄连、 干姜、乌药、丹参、百合、白芍、薏苡仁、炙甘草,其构成比为 13 ∶5 ∶5 ∶7 ∶15 ∶20 ∶20 ∶10 ∶5 。 TRIzol 试剂购自Invitrogen 公司;Taq 酶、Rnasin、 MMLV RT 反转录酶购自promega 公司; SYBRgreen购自美国ABI 公司; DNA Marker 购 2 , 自广州东盛生物科技有限公司; N- 甲基-N -硝基-N-亚硝基胍为美国Fluka 公司产品;oligo dT 序列,引物序列由恒博和泰生物科技 （北京）有限公司合成。 oligo dT 序列: 5-TTTTGTACAAGCTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-3;ß-actin （263 bp ）: 上游 5-GAGACCTTCAACACCCCAGCC-3, 下游5-AATGTCACGCACGATTTCCC-3; TFF1 (169bp )上: 5’-CTGGTCATTGAGAACCAGCAAGAA-3; TFF1下: 5’-TG