健脾化痰复方改善非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素敏感性的机制研究.pdfVIP

However, both serum and hepatic FFA concentration in Jianpi Huatan decoction-treating group significantly lower than those in metformin -treating group (P ﹤0.01). Conclusions Jianpi Huatan decoction has not only the same effect on improving insulin sensitivity in NAFLD rats as metformin but the prominent feature of lowering both serum and hepatic FFA. 非酒精性脂肪肝 （nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD ）是指由肝细胞脂肪变性发展 到炎症、纤维化的一组疾病，其发病机制至今尚未完全阐明，目前认为，NAFLD 的发生与 [1] [2] 胰岛素抵抗 （insulin resistance，IR ）密切相关 ，是IR 在肝脏中的一种表现 ，并作为代谢 综合征 （metabolism symptom ， MS ）的一个组成部分日益受到关注。研究表明，改善 IR [3] [4] 的药物如二甲双胍能够减轻NAFLD 的病理改变与肝功能异常 ，本课题基于前期工作 ， 采用高脂高热量饮食制备 NAFLD 动物模型，以二甲双胍为对照，观察中药健脾化痰复方 对NAFLD 大鼠胰岛素抵抗的干预作用 1.材料与方法 1.1 主要试剂 碘[125I]胰岛素放射免疫分析药盒购自北京华埠力特生物技术研究所，血清丙 氨酸氨基转移酶 （ALT ）、天门冬氨酸氨基转移酶 （AST ）试剂盒、肝组织甘油三酯 （TG ） 及胆固醇 （TC）试剂盒均购自 Human 公司，2 ％戊巴比妥钠、10％福尔马林购自上海试剂 三厂，蒸馏水、冰醋酸 （分析纯，乙酸浓度=99.5 ％）由山东中医药大学中心实验室提供。 1.2 主要仪器 电子秤购自上海天平仪器厂，721 型荧光分光光度计购自上海第三分析仪器 厂，DDL-5 型冷冻离心机购自上海安亭科学仪器厂，GMJ 型全自动放射免疫? 计数器购自 江苏省电子医疗研究所，恒温冷冻切片机购自德国徕佧公司，放射免疫仪购自北京东恒仪器 厂，AU2700 型全自动生化分析仪购自日本奥林巴斯公司。 1.3 动物模型制备 1.3.1 实验动物 健康雄性Wistar 大鼠50 只，体重 180 ｇ±15 ｇ，购自山东大学实验动物中 心。 1.3.2 非酒精性脂肪肝模型的建立 大鼠适应性喂养1 周后随机分层分组，正常对照组（n=9 ） 喂以普通饲料，正常饮水。模型组 （n=4 1）喂以高脂高热量饲料 （76.6％基础饲料+ 10％猪 油+8 ％蛋黄粉+5%蔗糖+0.2％胆酸钠+0.2％胆固醇），造模 12 周。 1.3.2 动物分组及处理 实验第 13 周开始将模型组大鼠随机分为健脾化痰复方组 （n=12 ）， 二甲双胍组 （n=9 ）及 18 周模型组 （n=9 ），药物治疗组分别灌胃健脾化痰复方水煎剂 （组 成：黄连、炒枳实、茯苓、陈皮、半夏、白蔻、丹参等，由山东中医药大学附属医院药剂科 制备）及二甲双胍混悬液，每天上、下午各一次进行灌胃，给药量按照体重70 公斤成人用 量换算，正常对照组及 18 周模型组以相同体积的蒸馏水灌胃，疗程均为6 周。 1.4 标本采集 造模至第 12 周末模型组处死 10 只大鼠，其余大鼠第 18 周末全部处死，处 死前禁食 12 小时，以2%戊巴比妥钠2ml/kg 行腹腔注射，麻醉后立即打开腹腔，经下腔静 脉取血分离血清。于大鼠肝右叶取体积为0.5cm ×1.0cm ×0.3cm 肝组织两块分别置于中性甲 醛溶液固定，OCT 包埋液氮固定。 1.5 观察项目及方法 1.5.1 体质量、肝质量及肝脏指数观察 随时记录大鼠活动、饮食、毛色、伤病等情况，并 于 12 周、18 周末测量大鼠体重和全肝湿重，计算肝脏指数：即肝质量 （g ）/体质量 （g