单次用药后头发中苯二氮卓类药物的分析及评价的研究.pdfVIP

——392—— 2011司跨鉴定理论与实践研讨会论文a‘ 单次用药后头发巾苯二氮卓类药物的分析 及评价研究 向平孙其然沈保华沈敏 (司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室，上海200063) 【摘要】苯二氮卓类药物是麻醉抢劫、迷奸等犯罪案件中最常见的药物，头发具有易采集、检出时限长、能反映长程的用 药信息等优点，可作为血、尿等生物检材的补充。本研究的目的是考察单次用药后苯二氮卓类药物在头发中的分布情况 以及与用药剂量的关系，并探讨应用分段分析确定单次用药的可行性。头发分段后采用冷冻研磨、液液提取，然后经液 相色谱串联质谱分析，方法最低检出限(LOD)在0．5．5 的相关性。剂量增大至4mg后，在2-4cm段头发中均可检出艾司唑仑，有的人甚至在4—6cm段头发中亦呈阳性。所建立的分 析方法亦应用于两例迷奸案件所采集的样品。结果表明，所建立的方法可应用于单次用药后的头发分段分析，但需要考 虑黑色素和扩散等作用的影响。 近年来，无论是国外还是国内，麻醉抢劫、迷奸等犯罪案件成明显上升趋势，严重侵害公民的人身和财 产安全，引起全社会的极大关注”】。在我国，苯二氮卓类药物因其可产生嗜睡、头昏、乏力、共济失调等中 枢神经系统抑制作用而成为此类案件中使用最多的药物。 苯二氮卓类药物安眠镇定作用非常强，临床用药基本在0．25mg至几个mg剂量。所以，麻醉抢劫和迷奸 案件所涉该类药物具有范围广、单次用药、剂量小、作用强、体内含量低、代谢速度快等特征，传统的气相色谱一 质谱联用技术由于灵敏度差而往往无法检测出血液和尿液中的痕量苯二氮卓类药物【2】，无法提供有效的摄药 证据。因此，该类药物所涉案件的侦破、定性一直是公安等执法机关的棘手和难点问题。 头发在法庭毒物分析领域有独特的应用价值。头发具有易采集，稳定、易保存及检出时限长、能反映长 程的用药信息等优点，可作为血、尿等生物检材的补充，甚至成为提供证据的惟一手段[3-8]o随着灵敏度高的 4】开始进行单次用药后头发中苯二 液相色谱．串联质谱(LC．MS／MS)技术的迅猛发展，P-Kintz所在实验室睁1 氮卓类药物的分析，并且应用于实际的麻醉抢劫、迷奸等犯罪案件中，在受害人头发中检出了阿普唑仑、7- P 氨基氯硝西泮和溴西泮等j Kintz实验室认为头发分析可以应用于单次用药的犯罪案件中，他们也发表了相 cm／月，建议在案发后第4-5周贴头皮采集头发样本， 关的解决方案¨51。根据头发的生长速度大约为0．7一1．4 然后从根部起按2crn分段分析。如果在贴根的2cm段头发中检出药物，而随后的两个2cm段头发中未检出药物， 则可判定为单次用药。 本研究将建立头发中18个苯二氮口类药物的LC．MS／MS分析方法，考察单次用药后苯二氮卓类药物在 头发中的分布情况以及与用药剂量的关系，探讨应用分段分析确定单次用药的可行性。 1材料与方法 1．1试剂 实验室。甲酸和乙酸胺来源于Fluka公司，乙腈购自Sigma公司。其它试剂均为国产分析纯。 1．2仪器及条件 API 4000串联三重四极杆质谱仪(美国Applied onForensic Pr-ocdc_．e Symposium Theory(and ——393—— 1．3样品前处理方法 头发样品用2mL二氯甲烷洗涤两次，晾干。收集最后一次的二氯甲烷洗液，空气流下吹于后，用1001．1 L 流动相复溶后进LC．MS／MS分析，以检测去污效果。晾干后剪成约lmm长，备用。 分别用将剪碎的头发段和撞子装入SPEX CertiPrep公司冷冻研磨机的样品瓶中，密封后将整个样品瓶浸 入液氮中，撞子在磁场作用下反复冲撞将样品粉碎。完毕后将样品瓶打开，取出粉碎后的头发样品粉末。 称取20mg头发粉末，置于10mL玻璃试管中，加入2mL