马兜铃酸_脱氧核糖核酸加合物质谱分析.pdfVIP

第 36卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 7期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2008年 7 月 Ch ine se Jou rnal of A nalytical Chem istry 930 ～934 马兜铃酸 脱氧核糖核酸加合物的质谱分析 + 1 2 2 1 季文萱 　杨成对 　刘密新 　谌贻璞 1 ( ) 2 ( ) 中日友好医院 ,北京 100029 　　　 清华大学分析测试中心 , 北京 100084 ( ) ( ) ( ) 摘 　要 　马兜铃酸 aristoloch ic acid, AA 经酶活化法 黄嘌呤氧化酶法 和化学活化法 锌法 活化后与脱氧 腺苷酸在弱酸环境下反应合成了 AA DNA 加合物 。采用多种质谱技术对加合物进行了鉴定 。电喷雾 质谱法 ( ) ( n ) ESIM S 负离子采集模式下测得其准分子离子峰分别为 m / z 62 1和 59 1;利用多级串联质谱 M S 等方法 ,得 ( ) 到了加合物的结构信息 ;应用傅里叶变换离子回旋共振质谱 FTICRM S 精确质量数测定和同位素模式检测 进一步确认了目标化合物 。结果表明 ,质谱法分析 AA DNA 加合物方便 、准确 、可靠 ,优于国外文献报道的 32 P后标记法 。 关键词 　马兜铃酸 ,脱氧核糖核酸加合物 ,合成 ,液相色谱 串联质谱法 ,傅里叶变换离子回旋共振质谱法 1　引　言 ( ) ( ) ( ) 马兜铃酸 aristo loch ic acid, AA 是马兜铃科 aristo loch iaceae 马兜铃属 aristo loch ia 植物所含的成 分 。含有 AA 成分的中药曾在国内外被用来治疗多种疾病 ,后被发现致突变 、致肿瘤和肾毒性等而引起 国内外学者广泛关注 [ 1 ] 。多项短期体内和体外实验均发现 AA 致癌性 [ 2 , 3 ] 。服用含 AA 的中草药引起 ( ) 的马兜铃酸肾病 aristo loch ic acid nep hrop athy, AAN 在国内发病率仍较高 ,其中一部分病人可并发泌尿 系统癌症 ,甚至在肾移植后仍可发生泌尿系统肿瘤 [ 4 ] 。多项研究认为具有特异性的 AA DNA 加合物是 上述肿瘤发生的重要原因[ 5～7 ] 。李伟等 [ 8 ] 用 LCM S检测马兜铃酸 ,刘养清等 [ 9 ] 用 HPLC 测定了中药配 伍中的马兜铃酸 。 鉴于 AA DNA 加合物在体内含量极微 ,加之体外制备时反应条件要求苛刻 、反应产率非常低以及 纯化非常困难 , 目前尚无 AA DNA 加合物的标准品 ,