高效液相色谱法测定熊果苷及其合成原材料中酚类化合物含量.pdfVIP

高效液相色谱法测定熊果苷及其合成原材料中 酚类化合物含量 姚永青钟晓红 陆翔王洁 丁洪流* （苏州市产品质量监督检验所；江苏苏州215104） 摘要：本文对熊果苷的合成过程进行了研究，建立起了高效液相色谱—二极管阵列检测 (HPLC-DAD)分析方法，对熊果苷样品及其中间产物中的相关杂质进行分离和定量。在此基础 上，考察熊果苷生产过程中相关杂质的传递过程。然后从工艺生产角度探讨相关物质的产生 原因，从而对工艺改进和工艺控制提出建议。 关键词：熊果苷，中间产物，相关杂质，高效液相色谱 0.前言 [1] 熊果苷（arbutin ）最初是由熊果等植物中分离的一种糖苷类化合物 ，学名为4-羟基苯基 -β-D-吡喃葡萄糖苷[2] 。其分子结构式如图1 所示： CH OH 2 O OH O HO OH OH 图1. 熊果苷的结构式 [3~4] 研究表明，熊果苷具有止咳、抗菌、利尿等药理活性功能 。同时，熊果苷能有效地抑 制皮肤中的生物酪氨酸酶（Tyrosinase ）活性，阻断黑色素的形成，达到美白的效果，是目前 国内外常用于美白化妆品中的主要原料[5~8] 。目前，熊果苷的工业合成主要是改进的Helferich 糖苷化法。Helferich糖苷化方法最初是用五乙酰葡萄糖在氯化锌或对甲苯磺酸作用下和对苯二 酚进行的苷化反应[9] ，后来经过对反应条件和催化剂的不断改进，该方法成为合成酚类糖苷的 主流方法。其合成步骤如图2所示： 2. [10] 图 熊果苷的化学合成方法 人工合成方法制备熊果苷，虽然克服了天然提取法的许多不足，但是采用了对人体有害 的氢醌为原料，因此对产品及其原材料的定量和定性检测，控制熊果苷的质量是很必要的。 -5 工业生产和应用中熊果苷纯度一般要求≥99%，对苯二酚含量要求2 ×10 ，重金属含量要求 -5 [11] [12,13] 1 ×10 。利用高效液相色谱法测定植物原料和化妆品中熊果苷的含量已有许多报道 ， 但关于测定熊果苷工业品及其中间产品中杂质的种类和分布，用于指导熊果苷的合成与纯化 的文章还未见报道。从生产工艺入手，追踪中间产品中相关杂质的情况，对于工艺优化、控 制相关杂质含量、提高最终产品的质量，有着非常重要的指导作用。 1实验部分 1.1仪器与试剂 仪器：美国Agilent1200 型高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（DAD）。色谱分离系统 的控制和记录由Agilent Chemstation色谱工作站完成。 试剂：对苯二酚标准品A.R.（南京化学试剂有限公司，含量﹥98%）；对苯二酚单乙酯标 准品（青岛沃克化工有限公司，含量为98%）；对苯二酚双乙酯标准品（TCI上海化成工业发 展有限公司，含量﹥98%）；熊果苷样品，五乙酰熊果苷（江苏鑫源生化科技发展有限公司）； 甲醇色谱纯（美国霍尼韦尔公司，HPLC级）；超纯水 1.2色谱条件 WELCHROM C18 柱：XB-C18 柱（150 mm× 4.6 mm i.d