遗传病基因诊断的研究进展.pdfVIP

临床儿科杂志2012年第30卷增刊 001 遗传病基因诊断研究进展 颜景斌曾溢滔 上海交通大学附属儿童医院(上海200040) 遗传病是指由于生殖细胞中的基因或染色体结 2基因诊断新技术简介 构变异导致的遗传性疾病。它是完全或部分由遗传 因素决定的疾病．常为先天陛。部分遗传病患者会 进入新世纪以来，随着人民生活水平的日益提 在出生一定时间后才发病。有时要经过数年甚至数 高，人们对严重危害身体健康和生活质量的遗传病 十年后才能}n现明显症状。目前大多数遗传病尚无 及m生缺陷的关注程度明显上升。也希望能够运用 有效的治疗手段。因此通过基因诊断的手段对其进 高新科技手段提高上述疾病的诊断效率，减少其危 行早期诊断就显得尤为重要。 害。而传统的基因诊断方法由于其存在一些固有的 缺陷，难以满足快速、高效、准确的诊断要求。因 1基因诊断技术的发展 此，以提高基因诊断的灵敏度、可靠性和检测效率 基因诊断又称DNA诊断或分子诊断。是运用 为目标，人们发展了多重连接探针扩增(multiple 分子生物学的技术来检测致病基冈或疾病相关基因 ligationprobe Resolution 的改变。或患者体内病原体所特有的核苷酸序列， 解曲线分析(High 以此作为疾病诊断的指标。由于它是对产生疾病的 因芯片等一系列新型的基因诊断技术．这些技术在 基因或核苷酸序列进行直接的检测，因此是最准确 实验原理、操作流程和分析方法上与传统的技术均 的一种诊断方法。 存在明硅的差异。 1976年美国加州大学旧金山分校教授简悦威2．1 MLPA及MLPA一微阵列芯片技术 (Y．W．Kan)首次应用分子杂交的技术在世界上首 次完成了d地中海贫血的基因诊断”。此后，基因 的，这是在一项PCR技术基础上发展起来的用 诊断技术得到了快速的发展。先后发展出了DNA 于同时检测基因组内多位点拷贝数变化情况的技 液相杂交和点杂交、基冈酶谱分析、限制性片段多 术11日I。该技术高效、特异，在一次反应中可以同时 检测多个基因或位点拷贝数的改变。目前已经应用 态性分析(nrLP)、寡核苷酸探针杂交、PCR扩增 等多种基因诊断技术方法．并相继完成了数十种遗 于多个领域、多种疾病的研究和基因诊断及产前 传性疾病的基因诊断2卅。 诊断等方面119-251。 国内的一些科研机构从80年代早期陆续开展了 该技术具有较高的灵敏度、分辨率和检测通量 相关的研究．建立了适合我周国情的基因诊断技术 以及较快的检测速递。与常规基凶诊断技术相比具 平台。同时对一些严重危害我围人民身体健康的常 有明硅的优势。MLPA操作简便，所有反应均在一 见遗传病。如地中海贫血、血友病等进行了基冈诊 个反应管中进行。有效地避免了误差和污染的产 断和产前诊断12l。本研究所经过近三十年的研究。已 生，因此具有较高的临床应用价值。但由于最终要 发展和建立了一整套对遗传病进行基冈诊断的技术、 通过毛细管电泳分辨长度差异来鉴别不同的探针． 方法和路线．率先在国内攻克了HbBart’s水肿胎因此每一个反应最多只能整合40-45对探针，检测 通量有限。而且，由于不同探针长度不同。造成 儿I判、HbH病I酬、B地中海贫I衄17一I、血友病19．m1、苯 丙酮尿症…·121、杜氏肌萎缩