质谱和相关技术在信号传导方面的研究进展.pdfVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　评述与进展 第 2 期 　 　　　　　　　　　　 　 　　　　　　　　　　 2003 年 2 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 232～238 评述与进展 质谱及相关技术在信号传导方面的研究进展 邓　斌1 ,2 　罗国安 1 1 ( ) 2 ( ) 清华大学生命科学与工程研究院 ,北京 100084 　　 云南烟草研究院 , 昆明 650106 ( 摘 　要 　细胞信号传导是近年来生命科学研究的热点之一。有关蛋白转录后修饰 如蛋白质磷酸化、乙酰化、 ) 糖基化等 ,信号肽序列测定 ,信号传导途径和多通道调节方式 ,蛋白自折叠及构象变化 ,小分子脂类信号分子 等研究由于质谱技术的快速发展而取得了突破性的进展。 关键词 　信号传导 ,质谱 ,双向凝胶电泳 ,高效液相色谱 ,数据库 ,评述 1 　引　　言 细胞信号传导 ( signal transduction) 是 20 世纪 90 年代以来生命科学研究领域的一大热点。最近几 ( ) 年 ,“美国科学信息研究所”ISI 对热点科学研究论文统计的数据表明 ,有关信号传导方面的研究均名 列前茅 ,而科技界的权威期刊《Science》和《Nature 》更是不定期地出版这方面的专刊。信号传导的基本概 ( ) 念是指细胞外因子通过与受体 膜受体或核受体 结合 ,引发细胞内的一系列生物化学反应 ,蛋白与蛋 白的相互作用,直至细胞生理反应所需基因开始表达的过程。主要内容包括细胞外因子、受体、第二信 使信号系统、蛋白蛋白的相互作用、G 蛋白、胞浆激酶、核受体等。 随着以软电离离子化质谱技术的飞速发展 ,质谱技术在信号传导的研究中发挥了越来越重要的作 ( ) ( ) ( ) 用。以电喷雾 ESI 、基质辅助激光解吸电离 MALDI 质谱及其与飞行时间质谱 TOF 结合的 QTOF 和 MALDITOF 技术 ,在不同方面加强了对信号传导中传导途径、信号蛋白的结构、磷酸化修饰及位点确定 1 ( ) 等的研究进展 。在 ESIMS 中 ,分辨率可达 4000 mz ,质荷比 。一般来说 ,分子量低于 100 kD 的多电 荷蛋白分子分子量都可被测定。而由酶消化的蛋白质或核酸混合物可在串联的四极杆检测仪中被分离 分析并提供部分肽段和核酸的一级结构和修饰后的结构信息。MALDI 和 TOF 的结合能使检测量程达到 6 ( ) ( ) 10 mz ,监测样品灵敏度可达 fmol 级。傅里叶转换离子回旋共振 FTICR 质谱则是通过使用高磁场 捕获离子 ,分辨率可达到 100000( mz ) , 10～50 amol ( 10- 18 mol) 的蛋白质和肽可被检测到2