四川凉山杜鹃叶中挥发油成分的GC%2fMS分析q.pdfVIP

GC—132 四川凉山杜鹃叶中挥发油成分的GC朋S分析 李红霞1董晓楠2丁明玉2+ (北京大学技术物理系北京100871)2(清华大学化学系北京100084) 1前言 杜鹃花科杜鹃属植物的叶中普遍含有黄酮类化台物和挥发油，对慢性气管炎疗效较 好。近年来对挥发油研究较多，发现大多数挥发油具有生物活性”。”。本文研究的凉山杜 鹃是生长在四川省凉山州海拔3500m以上山区的野生植物，是“金鹃咳喘停口服液”的 原料。该药对祛痰止咳效果显著，但其化学成分未见报道。 挥发成分提取法，该法将水蒸气蒸馏和馏出液的溶剂萃取两步合二为一，可把mg，L级的 挥发性有机成分从脂质或水质介质中浓缩数千倍。同时，sDE法所获得的足挥发油在有 机溶剂中的溶液．体积较大，便于操作，避免了通常蒸馏法提取精油时在器壁上吸附损失 及转移微量精油时的操作困难。根据这一思想及中国药典(1995年版)，结合一般实验室 的实际情况，我们设计了一套更简单有效的同时蒸馏萃取装置，用此装置提取凉山杜鹃叶 中的挥发油，并用气相色谱／质谱联用仪(GC／MS)进行了分析。 2实验部分 2．1仪器及材料 紫外．可见分光光度仪为shimadzuuv-2loos；高效液相色谱仪为美国ⅧiarI5000， cDs 带varim4们数据处理系统；气．质联用仪为HP5型。甲醇为色谱纯，乙酸乙酯、硫 酸和高锰酸钾为分析纯。杜鹃叶由四川西昌杨天制药有限公司提供。 2．2样品制备 称量干燥凉山杜鹃叶329，剪碎后装入蒸馏烧瓶中，加入约150mL去离子水至水面 恰好淹没杜鹃叶。水浴调至100℃，同时通入水蒸气进行蒸馏。连续蒸馏5h，停止加热， 从上端倒出乙酸乙酯，置于棕色磨口玻璃瓶中，存放于冰箱中待用。 2．3气相色谱一质谱条件 5℃，min；进样量O．8 汽化温度250℃；程序升温30也40℃，升温速度1 uL；分流比 75：1。EI．MS离子源温度190℃：电子能量70eV；发射电流0．4uA；倍增器电压2059V： 扫描周期1s。 ‘ 3结果与讨论 3．1定性反应 纸斑反应：在滤纸上先点l％KMnO．，后点所提取的挥发油与不点挥发油的斑点对比， 前者紫斑变黄，表明有大量不饱和物质存在。 还原反应：取少量挥发油粗产品加少许浓硫酸后变黄：以纯乙酸乙酯为参比，加浓硫 酸后不变黄。表明有不饱和化合物存在。 ’通讯联系人 -640- 3．2紫外吸收光谱分析 将所提取的挥发油粗产品置于冰箱中，有白色片状晶体析出。将该晶体溶于甲醇做紫 外吸收光谱，在20¨300舢范围内具有较强的紫外吸收，表明所得粗产品含有大量挥发 油成分。 3．3高效液相色谱分析 将萃取挥发油时的乙酸乙酯相和水相用oDs柱分离f矿(甲醇)：矿(水)=50：50溶液作流 动相】，240nm紫外检测。结果表明：挥发油成分在酯相中被明显富集，而留在水相中的 挥发油成分很少。 3．4气一质联用(Gc／Ms)分析 将含乙酸乙酯的挥发油溶液微热使悬浮物质溶解后作GdMs分析。共分离出72种 成分，经计算机检索并参照标准谱图和质谱的裂解规律，鉴定了34种成分。其中17种成 分与标准谱完全吻合，另17种成分是结合质谱的裂解规律与标准谱图鉴定出来的。还有 12种成分与标准谱吻合不够好，可能为标准谱未收入物质．我们对其结构作了推测，对 此类物质还需作进一步的结构确认工作。还有23种成分未能鉴定出其结构。 根据气．质联用定量分析的结果，可以看出烯烃是凉山杜鹃叶中挥发油的主要成分， 占38．46％，烷烃与酸的含量亦很高，分别为lo．47％，10．69％。烯烃中倍半萜共占10．20％， 单萜共占13．77％。已经鉴定的34种成分共占挥发油成分的78．66％，其中口-蒎烯(a． benzendicarboxylicac ester)、8-异丙基环【5．L acid，butyl-2·meⅡlylpropyl O]辛烷(bicyclo【5，