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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase 产品编号 产品名称 包装 D7093 Terminal Deoxynucleotidyl Transferase 500U 产品简介： Terminal Deoxynucleotidyl Transferase ，简称TdT ，中文名称为末端脱氧核糖核酸转移酶，是一种模板依赖的DNA聚合 酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA 的3’羟基端加上dNTP 。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。 用途：寡核苷酸或DNA 3’羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing) ；5’-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。 来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。 活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。 酶活性检测条件：200mM potassium cacodylate (pH7.2), 1mM CoCl2, 0.1mM DTT, 0.01% (v/v) Triton X-100, 10µM oligo(dT) 3 10, 1mM dTTP and 0.4MBq/ml [ H]-dTTP 。 纯度：不含DNA 内切酶和外切酶，不含RNase 。 酶储存溶液：100mM KAc (pH6.8), 2mM 2-mercaptoethanol, 0.01% (v/v) Triton X-100 and 50% (v/v) glycerol 。 Reaction Buffer (5X) ：0.125M Tris (pH7.2 at 25℃), 1M potassium cacodylate, 0.05% (v/v) Triton X-100, 5mM CoCl2 。 失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较 高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 D7093-1 TdT (20U/µl) 500U D7093-2 Reaction Buffer (5X) 0.4ml － 说明书 1份 保存条件： -20℃保存。 注意事项： 酶使用时宜放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. DNA 3’末端标记： a. 参考如下表格设置反应体系： 待标记DNA 10 pmol of 3-termini Reaction Buffer (5X) 10µl [α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol) 1.85 MBq (50µCi) TdT (20U/µl) 2µl 补充无核酸酶的去离子水 至50µl b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀) ，随后离心沉淀液体。