非洲鸵鸟(Struthio+camelus)免疫球蛋白基因研究进展.pdfVIP

·592· 第七部分水生动物及其他 非洲鸵鸟【Struthiocamelus)免疫球蛋白基因研究进展 黄甜，赵要风 (中国农业大学，农业生物技术国家重点实验室。北京 100193) 引言 免疫球蛋白是B细胞在对抗原刺激的免疫应答中产生的一类糖蛋白，它由两条重链和两条轻链组成，分为可 变区和恒定区。研究免疫球蛋白基因的结构和功能对了解免疫系统的起源和进化有重要作用。目前关于禽类免疫 球蛋白基因的报道很少，鸵鸟是现存最古老的鸟类，属于爬行类与鸟类之间的过渡物种，选择这个具有代表性的物 种作为研究对象可以完善鸟类免疫球蛋白基因的信息，同时更好的理解免疫球蛋白基因在禽类里的进化。 材料与方法 已有的研究报道显示IgM基因在脾脏中表达量最高而且在物种之间具有很高的同源性，根据这个特点将不同 物种的IgM基因序列进行比对设计一段同源序列的引物，使用鸵鸟的脾脏组织进行PCR扩增，根据扩增得到的鸵 同基因，然后进行基因组的验证及表达检测。 结果 定区序列与已经报道的鸡，鸭具有很高的同源性。并且组织表达显示出一定的特异性，其中IgM、IgY在脾脏中表达 量较高，IgA则在小肠和大肠中表达量最高。5RACE显示其可变区共有两个JH、VH差异不明显。Genomewalking显 示在基因组上也存在两个Jn，但是其中一个缺少完整的RSS序列为假基因。轻链实验结果显示脾脏只表达入型轻 链，而且恒定区只有一个．其信号肽序列完全一致，可变区进化树分析可分为两大家族。South鲫blotting显示IgM、 IgA、lgY在基因组上存在。Northern 肠，大肠，脾脏中表达，其中小肠，大肠表达量最高。实验结果显示在脾脏中表达一种特殊形式的IgA，它缺少了恒 walking显示其缺 定区的后两个外显子即IgA(△Fc)，组织表达检测显示它在小肠和大肠中也有明显表达，C,enome 失部位外显子临界部位存在剪切位点，Northern blotting显示这种特殊形式的免疫球蛋白主要在小肠和大肠中表 达。 结论与讨论 本研究显示非洲鸵鸟表达的免疫球蛋白基因种类与已报道的鸡，鸭类似，包括IgM、IgA、IgY兰种基因。但不 同的是其重链有两种JH，这预示着V区即抗原结合位点的多样性。目前已知在鸭里面报道有截短形式的IgY，即 的后两个外显子，通常这两个外显子在抗体与其受体结合及信号传导中起重要作用，鸵鸟里IgA这种特殊形式的 广泛存在说明其具有特殊的免疫应答机理。在鸡的轻链中，只有一个有功能的V和多个假基因，V区多样性是由假 基因作为供体通过染色体内基因转换机制产生的，鸵鸟轻链的5仇～CE结果显示不同的V区有相同的前导肽．说 明也是使用相同的机制来产生多样性。本项研究阐明了非洲鸵鸟免疫球蛋白基因的种类及表达。为更好的了解禽 类免疫球蛋白的进化以及疾病防治提供了基础。 关键词：免疫球蛋白；禽类；重链；轻链 致谢：本研究受国家杰出青年基金和教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-0B旬117)资助。