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( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究简报 第 9 期 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2004 年 9 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1189～1192 酿酒酵母凋亡细胞的毛细管电泳行为研究 温桂兰　项小兰　何金兰 (湛江师范学院化学系 ,湛江 524048 ) ( ) 摘 　要 　用醋酸诱导酿酒酵母 saccharomyces cerevisiae 作为细胞凋亡过程 , 用扫描电镜和流式细胞术两种检 测技术确证其细胞凋亡特征 :用 800 mmol/ L 乙酸诱导21 h 后的细胞在电镜图上出现明显表面皱缩、细胞壁内 陷;流式细胞图上出现典型凋亡峰 ———亚二倍体峰。详细探讨其高效毛细管电泳的行为 ,发现凋亡细胞在 300 nm 处的强吸收峰消失 ;凋亡细胞核在 220 nm 处 ,12～18 min 之间出现了一个新的分离峰。研究表明 ,毛细 管电泳非常适于对细胞凋亡过程进行动态特征监测。 关键词 　细胞凋亡 ,毛细管电泳 ,酵母菌细胞 1 　引　　言 1 ( ) 1972 年 ,英国学者 Kerr 首先提出细胞凋亡 apoptosis 。细胞凋亡是受基因控制的一种主动性细胞 ( ) 自杀过程,因而 ,又称程序性细胞死亡 programmed cell death ,PCD 。作为生理性细胞凋亡方式 ,凋亡可 以清除对有机体没有用的细胞,从而保持生命正常代谢运动 ;凋亡还参与机体的防御机制 ,可诱导细胞 凋亡来清除入侵的病毒 ;凋亡异常往往是某些疾病的重要的发病机制。因此 ,对细胞凋亡的研究将提高 人们对生命的认识 ,增强对疾病的防治。 细胞凋亡研究的当务之急是凋亡细胞的特征检测。目前 ,常用的检测技术主要有五大类型 :形态学 观察 ;生物化学法 ;酶联免疫分析法 ;流式细胞仪观察法和分子生物学检测法。但这些检测的指标均不 2 ,3 具特异性。所以 , 目前对细胞凋亡的确证必须结合多种指标进行综合判断 。这种综合判断不仅繁 琐 ,而且准确度极差 ,漏检率和错检率很高 ,用于定量分析误差更大。所以 ,拓宽细胞凋亡的判断标准 , 寻找更敏捷、更特异的检测方法具有重要意义4 ～9 。研究发现 ,将已凋亡的细胞质与未发生凋亡的细胞 核混合 ,该细胞核出现凋亡的特征 ,表明细胞质在细胞凋亡中比细胞核的作用显著。在细胞质中可能有 引起凋亡的成分4 。可见 ,若能将细胞的质、膜及核进行分离分析 ,可以发现细胞凋亡的共同特征。 ( ) 酿酒酵母 saccharomyces cerevisiae 是单细胞真菌的代表 ,尽管其基因组很小 ,但其生物学特性与真 核生物相似 ,而且它是一种易于培养的微生物。所以 ,酵母菌是研究基本生物学过程的首选菌种。本实 验用 800 mmol/ L 醋酸诱导酿酒酵母细胞产生凋亡过程10 ,用扫描电镜和流式细胞术两种检测技术确认