依据《纤维制品的抗菌性试验方法JIS+L+1902-2002》制作标准曲线的探索.pdfVIP

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2015-07-31 发布于安徽
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依据《纤维制品的抗菌性试验方法JIS+L+1902-2002》制作标准曲线的探索.pdf

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2006第五届中国抗菌产业发展大会 1．4．2稳定期菌液的制备取培养好的对数生长期菌液0．4mL，于20mL营养细菌培养基中，再振荡培养4h，即为稳定期菌液。 1．5吸光度(ABS值)的测定取培养好的稳定期菌液，按不同的设定稀释倍数(5、10、20、40倍)，依次进行稀释，(稀释液为 1．6活菌计数在无菌室内火焰旁进行操作。分别依次测定四个不同稀释倍数的菌落数。每个稀释倍数依次制定几个浓度梯度，用灭菌吸管各吸取1mL注入平皿。注入约15mL，45,-,一50C的营养琼脂培养基，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待培养基凝固后，翻转平皿，置37C±I*C培养箱内培养24h 后，进行菌落计数。用肉眼观察，点出菌落数，记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。 1．7标准曲线的制作运用生物统计ORG数据分析软件，以吸光度ABS值为横坐标，稳定期的菌液浓度为纵坐标绘制标准曲线。 2．结果与讨论 2．1菌液浓度为107!!108cftYmL标准曲线的制作。(见表1；图1、2) 表1 第一次实验结果第二次实验结果菌液浓度(cf-u／mL)吸光度(ABS值) 菌液浓度(cftYmL)吸光度(ABS值) 2．54×107 0．0686 2．23×107 0．0760 5．40X 0．1590 5．40X107 0．1251 107 9．65×107 0．2362 8．75×107 0．2692 1．54×108 0．4386 1．67×10s 0．4616 1E8 童萎室 3 卜 Q 倒瑙袋袋 8 矮疑粗粗7 0． 0．1 XAxlalⅫe ABS值 ABS值图1(第一次实验结果) 图2(第二次实验结果) 研究与开发由图1、2，我们可以看到，将菌液浓度控制在107,-．,108cfu／mL时，标准曲线的回归系数可达O．99 以上，准确度很高。 2．2茵液浓度为lop～106cfu／mL标准曲线的制作。(见表2；图3、4) cfu／mL，因为最终所用的菌液浓度为105cfu／mL，所以就考虑在制作标准曲线时，将其控制在10p 避免因再次稀释所产生的误差。同样，在同等条件下，重复两次实验。表2 第一次实验结果第二次实验结果菌液浓度(cfu／mL)吸光度(ABS值) 菌液浓度(cfu／mL)吸光度(ABS值)