益气活血健脾补肾法治疗结肠慢性炎症的作用及机制探讨.pdfVIP

的混悬液。 BP65、TGF·p、 (3)实验试剂与仪器DSS(分子量5000)，Fluka公司产品，配成3％浓度，NF—K 厂)，SYQ-ZDX-35B 京航空航天大学)．NikonP-Ⅲ显微摄影系统(日本)等。 小鼠给药量金匮肾气丸1629／kg／d，参苓白术散319，kg，d，保元汤10 SASP0 组织学损伤，用免疫组织化学、原位分子杂交方法观察NF-K 达。 3观察指标与方法 和隐血情况的评分相加，得出每只小鼠的DAI，以评估疾病活动’情况。 x 在解剖镜下观察结肠大体形态。每只小鼠于有严重炎症或溃疡处取组织标本(2mm10mm)，常规石蜡包埋、 的乘积表示。 BP (3)免疫组化ABC法检测NF—K mRNA表达，根据试剂盒说明书进行操作。 (4)原位杂交法检测NF-KBP65、TGF-B、COX一2、EGF 4统计学处理所有数据经SPSSl00统计软件处理，各组资料用i±S表示，采用非参数统计方法 Wilcoxon秩和检验比较各组资料问的差异，P005为差异有显著’陛。 =．结果 1判定标准 (1)采用半定量积分法”“计算免疫组织化学染色积分，即分别对每张切片的阳性细胞及阳性细胞着色程度 进行分级记分，结果以两项之和表示，阳性细胞率：每张切片检测5个视野(×400)，所见的阳性细胞分为0—4 弱阳性染色，记1分；2级为阳性染色，记2分；3级为强阳性染色，记3分。 (2)原位杂交判定方法：以细胞胞浆着色呈棕黄色为阳性。计算机图像分析采用北京航空航天大学图像分 张切片随机选取5个视野，用“体视学分析”模型作图像分析后，计算平均光密度和平均灰度。 天后，全部小鼠腹泻、血便症状均消失，大便隐血试验均阴性，体重恢复至饮用DSS之前的水平或略有增加， 体毛有光泽，活动正常，DAI值为0。组织学损伤评分的比较见表1。 表1各组小鼠组织学损伤评分的比较2+s +与正常组比较．P0 05 05；#与模型组比较，P0 3各组小鼠结肠组织NF-K 表2四种治法对小鼠结肠组织NF-KBP65及其mRNA表达的影响x±s 05 +与正常组比较，P0．05；撑与模型组比较，PO 4．各组小鼠结肠组织COX一2及其mRNA的表达。染色积分、平均光密度及平均灰度值的比较见表3。 表3四种治法对小鼠结肠组织COX．2及其mRNA表达的影响x±s 05 +与正常组比较，PO05；#与模型组比较，PO 225 5各组小鼠结肠组织TGF-131及其mRNA的表达。染色积分、平均光密度及平均灰度值的比较见表4。 表4四种治法对小鼠结肠组织TGF-D1及其mRNA表达的影响i±s 05 ’与正常组比较，P005；#与模型组比较，PO 6各组小鼠结肠组织EGF表达及其mRNA的表达。染色积分、平均光密度及平均灰度值的比较见表5。 表5四种治法对小鼠结肠组织EGF及其mRNA表达的影响i±s 05 #与模型组比较．P0 三．讨论