糖尿病患者血清对人视网膜内皮细胞凝血纤溶活性和氧化应激的影响.pdfVIP

32 中日友好医院学报 2011年第 25卷第 1期 JournalofChina-JapanFriendshipHospital 2011Feb，Vo1．25，No．1 ， 糖尿病患者血清对人视网膜 内皮细胞凝血纤溶活性和氧化应激的影响 许世清 ，刘虹麟 ，李 宓 ，叶丽亚 ，徐亚平 ，张文健 (1．中 日友好 医院 临床 医学研究所，北京 100029；2．中山大学附属第五医院 肾内科，珠海 519000) 摘要 目的：研究糖尿病患者血清对培养的人视网膜内皮细胞凝血纤溶活性和氧化应激 的影响。方法 ：分离人 胚胎视网膜组织 内皮细胞 (HREC)，用糖尿病患者血清或正常人血清分别培养48h，应用 ELISA法检测 HREC 释放 的凝血纤溶因子 ；应用试剂盒检测细胞 内活性氧 (ROS)水平 ；应用化学显色法检测细胞 内超氧化物歧化酶 (soD)、黄嘌呤氧化酶 (XOD)的水平及蛋 白激酶C(PKC)激动剂和抑制剂对其影响 。结果 ：糖尿病患者血清使 HREC组织 因子增多、尿激酶型纤溶酶原激活物降低和纤溶酶原激活物抑制物增加 ，与正常血清组相比具有显 著差异。与正常人血清组相 比，糖尿病患者血清使 HREC内ROS生成增多 ，XOD水平升高。并且这种作用可被 PKC激动剂促进，被PKC抑制剂降低。结论：糖尿病患者血清诱导视网膜 内皮细胞出现高凝血、低纤溶和氧化 应激 的功能改变 ，并且 PKC的激活在氧化应激反应 中发挥重要作用。 关 键 词 ：糖尿病 ；视 网膜病变 ；内皮细胞 ；凝血纤溶 ；氧化应激 ；蛋白激酶C 中图分类号 ：R363．2 文献标识码 ：A 文章编号：1001—0025(2011)ol一0032—05 doi：10．3969／j．issn．1001—0025．2011．01．010 Effects ofdiabetic serum on coagulation／fibrinolytie activity and oxidativestressofhuman retinalmi- crovascular endothelial cells／／XU Shi-qing，LIU Hong—liI-，LI M i，et al／／Journal of China-Japan FriendshipHospital，2011Feb，25(1)：32-36 Abstract Objective：Toinvestigatetheeffectsofdiabeticserum ontheeoagulation／fibrolysisactivityandOX· idative stress ofhuman retinalmicrovascular endothelial cells．M ethods：Human fetalretinal endothelialcells (HREC)wasisolatedandculturedinmedium containing20％ diabeticseurm ornormalseurm for48hours． Then theeoagulation／fibrinolytiefactorsreleased from HREC weredetected by ELISA．Reactiveoxygen species (ROS)wasdetectedbycommercialROSassaykit．Superoxidedismutase(SOD)andxanthineoxidase (XOO) weredetectedbychromogenicmethod，andtheeffectsofactivatorand inhibitorofproteinkinaseC(PKC)on SOD and XO