环磷酰胺睾丸毒性的研究进展.pdfVIP

环磷酰胺睾丸毒性研究进展+ 赵红乐综述 金保方6 【摘要】环磷酰胺(cP)是一种抗肿瘤和免疫抑制类药物，目前常用于临床治疗各种 恶性肿瘤及自身免疫性疾病。但是环磷酰胺作为细胞毒性和细胞抑制类药物，其毒副作用尤 其是生殖毒性越来越受重视。研究表明环磷酰胺可导致大鼠睾丸和附睾的组织病理学改变， 造成精子减少、活力减弱、畸形精子增多，睾丸、附睾重量减轻，甚至会影响生育及后代的 生长发育等。睾丸是雄性的主要生殖器官，睾丸损伤后主要造成精子生成和睾酮合成的障碍。 现就环磷酰胺睾丸毒性损伤的实验研究进展从造成生精细胞减少、增加生精细胞凋亡、抑制 精原干细胞的增殖和分化、损害支持细胞功能、损伤生殖细胞遗传物质、造成睾丸氧化应激 损伤、导致睾酮合成障碍等方面予以综述。 环磷酰胺(CP)是一种抗肿瘤和免疫抑制类药物，目前常用于临床治疗各种恶性肿瘤 及自身免疫性疾病。但是环磷酰胺作为细胞毒性和细胞抑制类药物，其毒副作用尤其是生殖 毒性越来越受重视。研究表明环磷酰胺可导致大鼠睾丸和附睾的组织病理学改变，造成精子 减少、活力减弱、畸形精子增多川，睾丸、附睾重量减轻，甚至会影响生育及后代的生长发 育等【2】。睾丸是雄性的主要生殖器官，睾丸损伤后主要造成精子生成和睾酮合成的障碍。现 就环磷酰胺睾丸毒性损伤的实验研究进展综述如下。 一、导致睾丸生精障碍 (一)生精细胞减少 正常生精小管中生精细胞的排列从外到内依次为精原细胞、初级精母细胞、次级精母细 胞、精子细胞、精子。睾丸中任何生精细胞的缺失都会造成生精障碍。Elangovan等【3】研究 环磷酰胺的生殖毒性与剂量的相关性，睾丸组织病理发现CP组小鼠精母细胞和圆形精子细 胞显著减少，生精小管中未发现精子，而且随着环磷酰胺剂量的增加，生精小管也出现明显 的萎缩。张长城等【4】采用流式细胞术检测小鼠在CP处理后各级生精细胞的比例，结果显示 CP处理组小鼠单倍体和四倍体细胞比例明显减少，提示CP能引起减数分裂和减数分裂后 阶段的生精障碍。有研究表明15，61，CP造成生精细胞减少，可能与引发小鼠睾丸组织环腺苷 酸反应成分调节子(CREM)表达的减少有关。CREM在睾丸组织中高表达，其mRNA在 粗线期精母细胞中就已经存在，在减数分裂后的生殖细胞中表达水平更高。CREM通过激 活单倍体精子细胞中的结构调节基因，促进单倍体细胞变态，进而形成精子。CREM缺失 小鼠，精子变态被阻断在早期，许多减数分裂后基因表达被抑制，精子计数减少46％，畸 形精子增加两倍，甚至无精子产生【7】o (--)生精细胞凋亡 CP诱导生精细胞凋亡以精原细胞和精母细胞最为显著，精原干细胞凋亡无显著改变。 1997年Cai等【8】研究了CP对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，TUNNEL的结果表明：环磷酰 胺可以诱导所有阶段的生殖细胞凋亡，以I～Ⅳ和XI～XIII阶段的精原细胞和精母细胞最 为显著。何大维【9】选用仅有精原干细胞和支持细胞的l周龄大鼠，腹腔注射CP处理，结果 1周组精原干细胞凋亡无显著增加，3周和9周组生殖细胞凋亡率显著高于正常对照组，推 测可能是和这两个年龄组生精小管中含精原细胞和细线前期的精母细胞较多有关。 作者单位：南京中医药大学男科研究所210023 通信作者：金保方，E-mail：hexil【ing@126．tom △审校者 145 大量研究表明，CP诱导生精细胞凋亡主要与bardbcl．W、Fas／Fasl等基因凋亡通路有关。 在生精细胞凋亡的过程中，促凋亡蛋白bax起主要作用，而抗凋亡蛋白bcl—W抑制这一 过程，bax／bcl—W比值是生精细胞、支持细胞发生凋亡的决定性因素。黄宗轩等【10】采用腹腔 注射CP，35天后免疫组化法检测小鼠睾丸生精细胞凋亡相关蛋白bcl—W、bax表达的情况， 结果显示模型组生精细胞bax与bcl．W表达的积分光密度值(IOD)之比较正常组增大，提 示CP可能通过bcl—W／bax途径诱导生精细胞的凋亡。 死亡受体Fas信号通路是哺乳动物生精细胞凋亡通过胱门蛋白酶的主要途径之一。宾彬 等【11】用CP处理小鼠，用免疫组织化学SABC法检测Fas和Fasl 蛋白在小鼠睾丸实质组织中的表达，结果与空白组比较，模型组Johnson评分偏低，Fas和 Fasl蛋白表达率偏高，提示CP可能通过此信号通路诱导生精细胞的凋亡，导致生精障碍。 (三)抑制精原干细胞的增殖和分化