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第33 卷 第7 期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vol. 33 ,No.7
2011 年 7 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Jul. 2011
doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.07.16
猪流行性腹泻病毒M 蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
1 1 1 2 1 1 1*
张志榜 ,陈建飞 ,时洪艳 ,杨 斌 ,石 达 ,陈小金 ,冯 力
(1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨 150001;
2. 内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特 010018)
摘 要:为制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗M 蛋白单克隆抗体(MAb) ,本研究以截短表达的His-M 重组蛋
白免疫BALB/c 小鼠;以截短表达的GST-M 重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交
瘤细胞,通过间接ELISA 进行筛选,得到一株稳定分泌抗M 蛋白MAb 。MAb 亚类鉴定为IgG2b 型,轻链为κ
5
链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为 1∶3 000 和 1∶2 ×10 。Western blot 试验表明该MAb 能
够识别重组及天然的PEDV M 蛋白。间接免疫荧光试验表明该MAb 能够与PEDV 感染的Vero E6 细胞产生特异
性免疫荧光。
关键词:猪流行性腹泻病毒;M 蛋白;单克隆抗体
中图分类号:S852.65 文献标识码:A 文章编号:1008-0589(2011)07-0568-03
Preparation of the monoclonal antibody against membrane protein
of porcine epidemic diarrhea virus
1 1 1 2 1 1 1*
ZHANG Zhi-bang , CHEN Jian-fei , SHI Hong-yan , YANG Bin , SHI Da , CHEN Xiao-jin , FENG Li
(1. State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences,
Harbin 150001, China; 2. College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Huhhot 010018, China)
Abstract : To prepare the monoclonal antibody (MAb) against of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), hybridomas were
produced by fusing SP2/0 cells with spleen cells from mouse immuni
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