猪肾碱性磷酸酶的提纯和性质研究.pdfVIP

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2015-08-03 发布于安徽
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猪肾碱性磷酸酶的提纯和性质研究.pdf

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6·73 · 　第 17 卷　第 8 期医学研究生学报 Vol. 17 　No. 8 　2004 年 8 月 Journal of Medical Post graduates Aug. 2004 ·论　　著· 猪肾碱性磷酸酶的提纯及性质研究史利宁 , 　孟　泽 , 　张春妮南京大学医学院临床学院 ( 江苏南京 210002) 南京军区南京总医院 ( ) 摘要 : 　目的:从猪肾中提取碱性磷酸酶 AL P ,并对其能否作为参考品进行研究。　方法 :从猪肾皮质中分离刷 γ 状缘微绒毛膜 ,用正丁醇溶解膜结合的酶 ,经硫酸铵沉淀 ,DEAESephacel 、ConASepharose 、Sephadex G200 及抗 ( ) ( 谷酰基转移酶 GGT 免疫亲和层析提纯 AL P 。　结果 :提纯的 AL P 比活达402 kU/ g 蛋白 ,几乎不含杂酶未检出 ) ( ) AL T 、AST 、ChE 、AM Y 、CK 、LDH , GGT 仅含 2 U/ 780 U AL P 。其对底物 4硝基磷酸酚 4NPP 的 Km 值为 1. 35 mmol/ L ,最适p H 值为 10. 40 。　结论 :提纯的猪肾AL P 与人血清中的AL P 酶动力学特性非常相似 ,为进一步研制 AL P 参考品奠定了基础。关键词 : 　碱性磷酸酶 ; 　提纯 ; 　酶参考品 ( ) 中图分类号: 　Q5554 　　　文献标识码 : 　A 　　　　文章编号 : 2004 Purif ication and properties of alkaline phosphatase from porcine kidney SHI Lining , MEN G Ze , ZHAN G Chunni