光化学法诱导大鼠脑皮质微血管梗塞凝血系统动态变化的研究.pdfVIP

维普资讯 墨■珥字 瓣 ．2004．14(3)：6667 ◎ 2004 aⅢ咂 JOIJi~M,OFMIa日0cmCIJI．A1l0 光化学法诱导大鼠脑皮质微血管梗塞 凝血系统动态变化的研究* 周 薇 胡 豫 魏文宁 [中圈分类号] R364．17 [文献标识码] A [文章编号] 1005—1740(2004)03—0066—02 mg／100g)；将大鼠固定于立体定位仪上，光化学冷 团■霸血管疾病是主要发生在中老年人的一种容盅易光源探头紧贴暴露的颅骨，以定位点为中心，2m／n 为半径，照射强度3000kb，照射时间20min。对照 是减少脑血管事件发生最重要的措施之一。目前脑 组除不光照外，余步骤同上。 血栓形成的机制尚未明确，血栓形成过程中凝血系 1．3 血浆标本的收集 统动态变化的研究少见报道，本实验通过建立大鼠 分别在光化学照射完毕后2h、4h、6h、24h从 脑皮质微血栓模型，对血栓形成过程中凝血系统的 心脏取血约2．5nll，加入 109nmol6 抗凝试管， 动态变化进行初步研究，为进一步深入研究脑血栓 离心后，吸取血浆等分于3个EP管中于一20℃冰 病理生理及防治提供基础资料。 箱保存待测。对照组亦于各时点抽血备检。 1．4 病理学检查 1 材料与方法 每组大鼠在相应时间点于4C，4％多聚甲醛灌 1．1 材料和仪器 注固定后取脑，在每个脑标本光照区取脑皮层组织， 光敏剂四碘四氯荧光素二钠，即玫瑰红B，购 自 将其中1mrfl3制成常规电镜切片，OptonEM一10电 上海试剂三厂；KL1500LCD型光化学冷光源仪为 镜观察。剩余标本固定、脱水、透明、石蜡包埋、制成 德国SCHOTT产品；检测 、Am 、Fbg采用 日本 4tan连续切片，HE染色，光镜观察。 SYSMEX公司CA-7000型全 自动凝血分析仪；TF 1．5 凝血系统相关指标的测定 含量试剂盒购 自Americandiagnosticainc．(ADI)： 血浆TF(：Ag)和vWF(：Ag)含量：酶联免疫吸 vWF含量试剂盒购 自福建太阳公司。 附法 (ELISA)，按试剂盒操作说明进行。常规凝血 1．2 方法 试验：PT、Am 、Fbg，全 自动凝血仪测定。 1．2．1 实验动物与分组：SD大 鼠，50只，雌性，重 1．6 统计学处理 量220g~280g(华中科技大学同济医学院实验动 检测结果用 ±s表示 ，差异的显著性检验采 物中心)随机分成5组，即对照组，血栓形成 2h组、 用单因素方差分析，P0．05表示差异有显著意义。 4h组、6h组、24h组，每组 10只。 统计学分析在SPSSII．0软件包上进行。 1．2．2 模型制备：6％水合氯醛腹腔注射麻醉(0．5 ml／100g)后，固定大鼠头部 ，消毒，正中纵向切开 2 结 果 头皮，暴露右侧颅骨，小心分离骨膜以免损伤颅骨表 2．1 病理组织学观察 面影响其透光性，定位前囟后约 1．8m／n，中线旁右 2．1．1 HE染色光镜观察：光镜下对照组脑皮质神 侧2．5mm；从股静脉缓慢推注 2％玫瑰红B(30 经元、胶质细胞、血管内皮细胞均正常，血管腔内无 血栓阻塞(图 1)；实验组各组可见梗塞灶呈碗状 ，由 *[基金项 目] 国家自然科学基金资助项目(3O17O392) 软脑膜延至皮质深层，病灶中心微血管内血栓形成 [作者单位]华中科技大学同济医学院附属协和