肺炎链球菌新生儿分离株红霉素耐药性和耐药相关基因的研究.pdfVIP

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2015-08-04 发布于安徽
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肺炎链球菌新生儿分离株红霉素耐药性和耐药相关基因的研究.pdf

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·304· 肺炎链球茵新生儿分离株红霉素耐药性与耐药相关基因研究郑亚芬承晓京韩小雅宋海英魏梓文 10 肺炎链球菌(Strep咖pneumoniae，蹬N)是引起人类 DNA聚合酶1U。全部反应体积 mmol／L，NPa00．5％，Taq 细菌性肺炎的最常见病原菌，儿童感染SPN的耐药率往往高 20ul，其中模板液5ul。热循环参数为：93℃予变性2min，然后于成人。据统计，在全球每年有三百多万儿童死于由SPN感 1rnin 按93℃30s一55℃30s--72C 30s，共35周期。染而引起的肺炎、菌血症或脑膜炎。最近国内研究者报道Sp PCR试剂盒由无锡市克隆遗传技术研究所提供。enn、临床分离株对红霉素耐药率较高。为了解常州地区新生儿 mefA对照DNA由无锡市克隆遗传技术研究所微生物DNA 收集与保存室提供。 SPN临床分离株红霉素耐药的确切状况，我们对2003年12 月至2004年5月从常州市妇幼保健院新生儿病房呼吸道感结果染中分离到的20株SPN菌进行了红霉素药敏试验和与红霉 20株临床分离SPN红霉素药敏试验17株耐药，3株敏素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因(ernl)、主动外排转运基因(mefA)检测。现报告如下：材料与方法或俐me／基因(100％)。20株SPN菌红霉素药敏与㈣、 md基因数据见表1。erIll、md 一、SPN分离鉴定与药敏20株SPN菌均分离自新生 A基因PCR电泳图分别见图儿病房住院者呼吸道感染患儿的痰和咽拭子标本。标本采集 1。 1小时内即接种于绵羊血平板，置5％的c02培养箱内孵育表l 20株SPN茵红霉素药敏与a∞、mdA基因检出情况 18—24小时，根据茵落特征，镜下形态，奥普托欣(OptOchin) reef 菌株号红霉素药敏试验 elrn基因 A基因试验鉴定。20株SPN均经duPlessis等报道的SPN种特异 + + 1 S 5一c瞄 2 R + + PCR检测确认(靶基因为pbp2B。引物序列为P1 GCY 3 R + + ACCATTGATTTG TTCCAA一35一TTTGCA 7．P2 ATAGTT(℃rACATACTG一3’，目的产物长682bp)。红 4 R + + 气 R + + 霉素药敏试验采用纸片扩散法，按照美国临床实验标准化委 6 R + + 员会1999年M100一S10操作和判断结果。标准菌株 7 S + 一