Ang-1基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死的实验研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(2)：241—247 · 241 · [文章编号] 1000—4718(2009)02—0241—07 Ang-1基因修饰的骨髓 间质干细胞移植治 疗脑梗死的实验研究术 陈柏龄 ， 陈东平 ， 张志坚 ， 黄东煜 ， 吴秀丽 ， 张彦定 (福建医科大学附属第一医院神经内科， 福建省神经病学研究所，福建 福州350005； 福建医科大学神经生物学中心，福建 福州350004； 福建省师范大学生命科学院，福建 福州350007) [摘 要】 目的：观察血管生成素一1(Ang一1)和骨髓间质干细胞 (MSCs)对脑梗死的联合治疗作用。方法 ： 构建带有大鼠Ang—J基因的慢病毒载体 ，感染大鼠骨髓间质干细胞 (rMSCs)获得可表达具有生物活性Ang一1蛋 白的rMSCs(Ang—rMSCs)。制备大鼠大脑中动脉栓塞模型，随机分为对照组、Ang—rMSCs组及空载体 一rMSCs (pNL—rMSCs)组。脑栓塞术后24h进行细胞移植。各组大鼠分别于术后 24h、移植后 1周 、1月及 3月用 mNSS 量表评价神经功能状况，移植后 1周应用伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性，应用荧光激发及荧光免疫组化观察 移植细胞在脑内的存活、分化情况 ，并经组织学观察有无成瘤迹象。结果：与对照组相 比，移植后 1周、1月， pNL—rMSCs及Ang—rMSCs组神经功能改善明显(P0．01)，Ang—rMSCs组明显优于pNL—rMSCs组(P0．001)。 移植后3月3组间的mNSS评分差异无显著 (P0．05)。EB检测示血脑屏障通透性在pNL—rMSCs及Ang—rMSCs 组低于对照组 (P0．01)，Ang—rMSCs组低于pNL—rMSCs组 (P0．01)。移植后 1周、1月及 3月，Ang—rMSCs和 pNL—rMSCs组在荧光激发下均见移植细胞在梗死灶及其周边区聚集并存活。荧光免疫组化检测示Ang一．rMSCs 组中移植细胞大量表达 Ang一1，两移植组中均有部分细胞可同时表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白 (NF)或星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋 白(GFAP)。未观察到移植细胞异常增殖等成瘤迹象。结论： Ang—J基因修饰的rMSCs移植后可迁移至脑梗死灶周围，分化表达神经细胞标志物并较长期存活。MSCs移植与 其分泌的Ang一1蛋白可协同促进脑梗死后神经功能恢复。 [关键词] 骨髓间质干细胞；慢病毒载体；血管生成素一1；脑梗死 [中图分类号】 R363 [文献标识码] A TherapeuticefficacyofAng一1gene—modifiedM SCsin cerebralinfarc- tion CHENBai—ling，CHENDong—ping，ZHANGZhi—jian’，，HUANGDong— yul1 WU Xiu—li，ZHANG Yan—ding4 ， (D‘epartmentofNeurology，TheFirstAffiliatedffospitalofFujianMedicalUniversity，FujianProvinceInstituteofNeurolo— gY，Fuzhou350005，China；CenterofNeurobiology，FujianMedicalUniversity，Fuzhou350004，China；Collegeofrife Science，FujianNormalUniversity，Fuzhou350~307，China．E—mail：zzjzffy@medma il．con．cn) [ABSTRACT] AIM：ToobservethehterapeuticefficacyofAng—Jgene—modifiedmesenehymalstemcells (MSCs)incerebralinfarction．METHODS：TheconstructedlentiviralvectorcarryingtheAng—Jgenewasusedt