AQP3缺失小鼠尿素和尿浓缩能力的研究.pdfVIP

· 2l36· 中国痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(11)：2136—2140 [文章编号] 1000—4718(2009)11—2136—05 AQP3缺失小鼠尿素和尿浓缩能力的研究术 朱建国 ， 刘喜春 ， 赵雪俭 ， 赵 丹 (‘吉林大学中日联谊医院耳鼻咽喉一头颈外科，吉林 长春 132001； 吉林大学基础医学院病理生理教研室，吉林 长春 130021) [摘 要] 目的：肾脏表达水通道蛋白3(AQP3)在尿浓缩机制中起着极其重要的作用。AQP3缺失小鼠表现 为尿浓缩功能严重障碍。为阐明这种基因缺失的生理特性和发生机制，我们利用AQP3基因敲除小鼠和野生型小 鼠复制急性尿素负荷动物模型，对其作用机制及影响进行研究。方法：对小鼠实施急性尿素负荷，从实验前2h到 尿素负荷后第8h，每隔2h收集 1次尿样分别检测尿量、尿渗透压及尿素浓度。分离肾脏组织 RNA进行实时荧光 定量 RT—PCR反应。应用Westernblotting分析肾组织中尿素转运蛋 白(UTs)的变化。结果：给予尿素后 4h左 右，2种不同基因型小鼠均有负荷尿素的排泄。尿素负荷后AQP3缺失小 鼠尿的渗透压和尿素含量逐渐增高，第 8h，几乎与野生型小 鼠值相等，但尿中非尿素溶质浓度却没有改变。在最后4h内尿量下降到基础值的 1／4。 AQP3基因缺失和野生型小鼠尿素负荷显著地上调了uT—A3的表达。结论：AQP3基因缺失并没有直接干扰肾脏 对尿素的浓缩功能，但却减弱了对尿中其它溶质浓缩的能力。这种对溶质选择性的反应是由于AQP3对水和尿素 转运能力的不同所致。结果表明AQP3对尿中非尿素溶质的浓缩具有特殊作用。 [关键词] 转基因小鼠；尿素转运蛋白；水通道蛋白3；尿素 [中图分类号] R363 [文献标识码] A UreaandurineconcentratingabilityinmicelackingAQP3 ZHUJian—guo，LIUXi—chun，ZHAOXue—jian，ZHAODan (DepartmentofOtorhinolaryngology—HeadandNeckSurgery，China一．，叩ⅡnUnionHospital，JilinUniversity，Chang— chun132001，China；DepartmentofPathophysiology，BaiThunEnSchoolofMedicalSciences，JilinUniversity，Chang— chun130021，China．E—mail：zhaodanO106@yahoo．con．ca) [ABSTRACT] AIM ：Aquaporin3(AQP3)waterchannelexpressedinthekidneyplaysacriticalroleintheurine concentratingmechanism．MicewithAQP3deletionshowaurinaryconcentratingdefect．Tobettercharacterizethisdefect， westudiedtheinfluenceandmechanismofanacuteurealoadinconsciousAQP3一nullandwild—typemice．METH- oDS：Urinewascollectedandassayedevery2h，from2hbefore(baseline)to8haftertheureaload．Urinevolume， urineosnolalityandureaconcentrationweremeasured．RNAwas isolatedrfom thewholekidneyandreal—timePCR was carriedoutusingaLightCycler．TotalproteinofUTswasassayedrfom kidneytissuebyWestern blotting．RESULTS：Mice ofbothge