IgA1与系膜细胞共培养上清对足细胞分泌TNF-α的影响及机制探讨.pdfVIP

· 1786· ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(9)：1786—1790 [文章编号] 1000．4718(2009)09—1786—05 lgA1与系膜细胞共培养上清对足细胞分泌 TNF一 的影响及机制探讨 王 成， 刘 迅， 彭 晖，唐 骅， 叶增纯， 娄探奇 (中山大学附属第三医院肾内科 ，广东 广州510630) [摘 要] 目的：探讨 IgA肾病血清 IgA1与系膜细胞共培养上清对足细胞分泌TNF—ot的影响及机制。方 法：Jacalin亲和层析柱和SephaerylS一200分子筛用来纯化蛋白，单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IsA1(aIgA1)， 同步化的系膜细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养，收集上清，分别与同步化的足细胞作用；ELISA检测足 细胞上清TNF～0【水平，realtimePCR检测凋亡相关基因Ang、ACEmRNA表达情况。结果：IgAN患者来源的aI吕Al 与系膜细胞共培养得到上清可刺激足细胞分泌TNF—d，其水平显著高于对照组[(12．47±1．45)ng／L105(2．33± 0．65)ng／L，P0．05]。与对照和健康上清组相比，该上清可上调足细胞 Ang和ACEmRNA显著升高(P0．05)。 依那普利拉(10 mol／L)可使该上清作用后的足细胞分泌的TNF— 显著下降至(7．52±1．12)ns／L(Po．05)； 而缬沙坦(10 mol／L)则使之下降至 (6．64±0．68)ng／L(P0．05)；而依那普利拉 (0．5×10 mol／L)和缬沙坦 (0．5×10 moVL)联合治疗可使足细胞TNF一 下降至(2．72±0．55)ns／L，与对照无显著差异(P0．05)。结 论：IgA肾病患者血清 IgAl与系膜细胞共培养上清可通过激活肾素 一血管紧张素系统而刺激足细胞 INF—ot分 泌，参与 igar~的进展。 【关键词】 肾小球肾炎，IGA；足细胞；肿瘤坏死因子 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Releaseoftumornecrosisfactor一 inpodocytesand itsmechanism by mesangialcellculturedmedium withIgA1from IgA nephropathy WANG Cheng，LIUXun，PENG Hui，TANG Hua，YEZeng—chun，LOUTan—qi (DepartmentofNephrology，TheThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUnivemi@，Guangzhou510630，China．E—mail： Loutq@163．corn) [ABSTRACT] AIM：Toexploretheeffectandmechanismontumornecrosisfactor一0【productioninpod0cesby medium from growtharrestedmesangialcellsincubatedwithalgAlisolatedfrom IgANpatientsandnormalcontro1．METIt· ODS：JacalinaffinitychromatorgaphyandSephacrylS～200molecularsievechromatographywereusedtoisolateIgA1． MonomericIgA1(mIgA1)wastransformedtoaggregatedIgA1(aIsA1)byheating．IgA—mesangialcellmediumwaspre— paredbycollectingmedium inwhichrgowtharrestedmesangial cellwereincubatedwithdifferentalgA1，thenthemedium