Akt、ERK1%2f2活化在脑源性神经营养因子促血管新生中的作用.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(5)：833—838 · 833 · [文章编号] 1000—4718(2007)05—0833—06 · 论 著 · Akt、ERK1／2活化在脑源性神经营养因子 促血管新生中的作用永 王雅丹， 胡 豫 ， 孙春艳 (华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所，湖北 武汉430022) [摘 要] 目的：探讨脑源性神经营养因子(BDNF)促进血管新生的作用及其参与的信号通路，为抗肿瘤血 管生成的研究提供新的实验依据。方法：以人脐静脉内皮细胞为对象，采用 Western 印迹方法检测细胞内磷酸化 Akt、ERK1／2蛋白质的表达；采用Transwell小室迁移实验 、管腔形成实验评价体外内皮细胞血管新生的能力，MTr 法检测内皮细胞增殖活性 ，FITC—Annexin—V／PI双染流式细胞术分析细胞凋亡。结果：BDNF以时间依赖性方式 激活PDK／Akt和MEK1／ERK信号通路。分别应用PDK激酶抑制剂Ly29dO02、MEK1激酶抑制剂PD98059可以明 显阻断BDNF对PI3K／Akt、MEK1／ERK信号通路的激活。100XIs／L的BDNF体外促 内皮细胞血管新生能力与 25 L血管内皮生长因子(VEGF)相当，其中BDNF诱导的细胞迁移分别被 Ly294002和PD98059阻断，其抑制 率分别约为74％和36％；同样，Ly294002、PD98059可部分阻断BDNF诱导的小管形成效应 ，其阻断率分别约57％ 和37％；而BDNF的促增殖效应仅被PD98059拮抗，抑制凋亡效应仅受 Ly294002影响。结论：BDNF在体外有促 血管新生的作用。PI3K／Akt和 MEK1／ERK信号通路以不同机制共同调节这一过程，其中PI3K／Akt信号通路起着 更为重要的调节作用。 [关键词] 脑源性神经营养因子；新生血管化，生理性；信号转导 [中图分类号】 R363 [文献标识码] A AktandERK1／2areinvolved inbrain derivedneurotrophicfactor—in． ducedangiogenesisofendothelialcells WANGYa—dan．HU Yu．SUN Chun—yan (InstitutoinofHematology，UnionHospitalAffiliatedtoTongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceand - noolgy，Wuhan430022，China．E—mad：huyu1964@163。net) [ABSTRACT] AIM ：ToinvestigatetheroleofPI3K／AktandMEK1／ERKpathwayinhtebrainderivedneurotro- phicfactor(BDNF)一inducednagiogenesisinvitroandtoexplorethefurthermolecularmechnaisms．METHODS：The phosphorylationsofAktnadERK1／2weredetectedinhumnaumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)byWesternblot- ting．Th enagiogenicactivityinvitrowasevaluatedbytrnaswellmigrationassayandtubuleformationassay．Cellprolifera— tionWas detemr inedbycrystal violet