Akt抑制剂perifosine抑制胃癌细胞增殖并诱导凋亡的实验研究.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 201l27(§)’1084-1Q [文章编号] 1000—4718(2011)06—1084～06 Akt抑制剂 perifosine抑制胃癌细胞增殖并 诱导凋亡的实验研究 费洪荣 ， 陈洪蕾 ， 辛晓明 ， 赵雪梅 ， 王凤泽 (泰山医学院 药学院，。生物科学学院，山东 泰安271016) [摘 要] 目的：探讨新的Akt抑制剂perifosine对胃癌细胞增殖与凋亡的影响。方法：采用 MTr法检测 perifosine对 胃癌细胞SGC一7901细胞增殖的影响；流式细胞术分析细胞周期变化；AnnexinV—FITC试剂盒检测细 胞凋亡；免疫印迹法检测蛋白表达水平。结果：Perifosine能够抑制 SGC一7901细胞的增殖，且抑制作用呈时间和 剂量依赖性。胃癌细胞经perifosine处理后 ，细胞阻滞于G期 ，p21表达水平增加，而cyclinB1的表达受到抑制；凋 亡诱导现象随着perifosine剂量的增加而增强。免疫印迹结果显示perifosine活化SGC一7901细胞内caspase一3、 caspase一9及其底物多聚(ADP一核糖)聚合酶(PARP)，促进凋亡诱导蛋白Bax的表达 ，并抑制 Bcl一2的表达。结 论：Perifosine对人胃癌细胞SGC一7901的生长具有显著的抑制作用，其凋亡诱导活性与调节 caspase家族和Bcl一 2家族蛋白的表达密切相关。 [关键词] 胃肿瘤；Perifosine；PI3K／Akt通路；细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶类；Bcl一2 [中图分类号] R966 [文献标识码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．06．008 Perifosineinhibitscellproliferationandtriggersapoptosisinhumangas· triccancercelllineSGC一7901cells FEIHong—rong ，CHEN Hong—lei，XIN Xiao—ming ，ZHAO Xue—mel一，WANG Feng—ze (CollegeofPharmacology，SchoolofBiologicalScience，Ta~hanMedicalUnivershy，Taian271016，China．E—mail： wfi221@sina．corn．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofperifosine，anovelinhibitorofAkt，onthecellproliferationand apoptosisinhumangastriccancercelllineSGC一7901．METHODS：CellgrowthinhibitionwasdetectedbyMTTassay． Cellcyclewasanalyzedbyflow cytometry．AnnexinV—FITC apoptosisdetectionkitwasusedtodetermineapoptosisinthe cells．ProteinexpressionwasexaminedbyWesternblotting．RESULTS：Aktphosphorylationwasdose—dependentlyin． hibitedbyperifosineinSGC一7901cells．TheresultsofMTFandcellcycleanalysisindicatedthatperifosineinhibitedthe growthofhumna gastriccancercellsinadose—dependentmanner．PerifosinearrestedthecellcycleprogressionatG2 phase．Apoptosisinductionbecamemoreeffectivewithi