Prohibitin在低胆固醇培养人前列腺癌细胞系PC-3中表达上调及其可能机制.pdfVIP

· 2116· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(11)：2116—2119 [文章编号] 1000—4718(2011)1l一2ll6一o4 Prohibitin在低胆 固醇培养人前列腺癌细胞系 PC一3中表达上调及其可能机制术 董 培， 李永红， 尧 凯， 刘卓炜， 周芳坚 (华南肿瘤学国家重点实验室，中山大学肿瘤防治中心泌尿外科，广东 广州 510060) [摘 要] 目的：探讨prohibitin(PHB)表达上调在低胆固醇培养抑制前列腺癌PC一3细胞增殖中的作用及 对前列腺癌进展的影响。方法：PC一3细胞分别培养于普通和低胆固醇培养基中48h后，real—timePCR鉴定 PHBmRNA的差异表达。克隆PHB基因启动子片段，构建萤光质粒并转染至Pc一3细胞，检测细胞培养基中胆固 醇变化对于PHB基因启动子萤光素酶表达影响。结果：低胆固醇培养基组中PHB表达上调约 19倍，在低胆固醇 培养基的前列腺癌PC一3细胞中P日B基因启动子质粒萤光素酶表达显著增强，同普通培养对照组相比有显著差 异。结论：PHB在低胆固醇培养前列腺癌PC一3细胞中表达显著增强，这可能是前列腺癌细胞在不利于增殖条件 下的一种 自我保护调节机制。 [关键词] 前列腺肿瘤；胆固醇；Prohibitin；启动子 [中图分类号] R737．25 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．11．014 Cholesteroldepletion up ——regulatesexpression ofprohibitin in human prostatecarcinomaPC ．．3cells DONGPei，LIYong—hong，YAOKai，LIUZhuo—wei，ZHOUFang—jJan (StateKeyLaboratoryofOncologyinSouthernChina，DepartmentofUrology，CancerCenter，SunYat—senUniversity， Guangzhou510060，China．E—mail：zho@@sysucc．org．Cn) [ABSTRACT] AIM：Tostudyhowcholesteroldelpetionaffectsprohibitinexpressionandthedevelopmentofpros— tatecancer．METHODS：HumanprostatecarcinomaPC一3cellswereculturedinnormalmedium (NM)andcholesterol delpetionmedium (CDM)for48h．ThemRNAexpressionofprohibitinwasdetectedbyreal—timePCR．Prohibitinpro— moterwasclonedandinsertedintoPGL3一Basictoreconstructplasmid．TheplasmidwastransientlytransfectedintoPC一 3cells．Thecellswereculturedinthemedium withdifferentconcentrationsofcholesterolofr48handluciferaseexpression wasdetected．RESULTS：Theresultsofreal—timePCR showedthatthemRNA levelofprohibitinincreasedabout19 timesinPC一3cellsinthepresenceofCDM ．Aftertransfeetedwithprohibitinpromoterplasmidofr48h．PC一3cellscul— turedinCDM hadhigherlueiferaseexpressionthanthecellsculturedinNM orinCDM withcholestero