siRNA下调astrocyte+elevated+gene-1对神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡影响的体外研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(4)：705—710 · 705 · [文章编号] 1000—4718(2011)04—0705—06 瘤细胞增殖和凋亡影响的体外研究 刘海燕 ， 姜玉杰 ， 孙若鹏。 (山东大学附属省立医院 儿科 ，血液科 ，山东 济南 250021；山东大学齐鲁医院儿科 ，山东 济南 250012) [摘 要] 目的：探讨siRNA下调astrocyteelevatedgene一1(AEG—J)表达对神经母细胞瘤细胞增殖、凋亡和 细胞周期的影响。方法：用设计合成的AEG一1siRNA转染神经母细胞瘤细胞株M17和SK—N—SH，采用荧光定 量RT—PCR技术观察AEG一1siRNA对AEG—J基因表达的影响；用MTr法和克隆形成实验观察 AEG一1siRNA 对神经母细胞瘤细胞的增殖抑制作用；用流式细胞术检测下调AEG—J表达对神经母细胞瘤细胞凋亡及细胞周期 的影响。结果 ：用AEG一1siRNA转染人神经母细胞瘤细胞，RT—PCR结果证实AEG一1siRNA能显著基因下调 AEG—J表达，与对照组相比有显著差异(P0．O1)；MTY法和克隆形成实验结果证明下调AEG—J表达可显著抑 制神经母细胞瘤细胞的增殖；流式细胞术检测结果表明下调AEG—J表达可促进神经母细胞瘤细胞凋亡 ，并将细胞 周期阻滞在 Go／G．期。结论：AEG一1siRNA可下调基因在神经母细胞瘤细胞中表达，并抑制神经母细胞瘤细胞 增殖，促进细胞凋亡。 [关键词] 基因，AEG一1；RNA干扰；神经母细胞瘤；细胞凋亡 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．40．016 Knockdownofastrocyteelevatedgene1bysiRNA inhibitscellprolifera·· tionandinducesapoptosisinhumanneuroblastomacellline LIUHai—yan，JIANGYu—jie，SUNRuo—peng (DepartmentofPediatrws，Department ofHematology，ProvincialHospitalAffiliatedtoShandongUniversity，Jinan 250021，China；DepartmentofPediatrics，QiluHospital，ShandongUniversity，Jinan250012，hCina．E—mail：tai~iy- an26@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofsiRNA—inducedastrocyteelevatedgene一1(AEG—J)down— regulationontheproliferation，apoptosisandcellcycleofneuroblastomacells．METHODS：AnsiRNA targetingtoAEG 一 1mRNA (AEG一1siRNA)wasconstructedandtransfectedintoneuroblastomacellswithLipofectamine2000．Anon— specificsiRNA (controlsiRNA)andnon—treatmentwereusedasnegativecontrolandblankcontrol，respectively．The cellproliferationwasdetectedbyM，I．Imethodandcolonyformationassay．Th eapoptosisnadcellcyclewerenaalyzedby flow cytometry．RESULTS：Comparedwithcontrolgroups，theexpressionofAEG一1mRNAwasevidentlydeclinedinthe cellstransfect