siRNA抑制胃癌细胞BGC-823及裸鼠皮下移植瘤中生存素的表达.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(7)：1283—1287 · l283 · [文章编号] 1000—4718(2009)07—1283—05 siRNA抑制 胃癌细胞 BGC一823及 裸鼠皮下移植瘤 中生存素的表达 谯 敏 ， 向廷秀 ， 王丕龙 (重庆医科大学附属第一医院 消化内科 ，实验研究中心，重庆400016) [摘 要] 目的：探讨 RNA干扰用于胃癌治疗的可行性与特异性。方法：设计靶向生存素基因的小干扰 RNA，并导人 胃癌BGC一823细胞株和裸鼠皮下移植瘤，在体内、外诱导 RNA干扰，采用 M．rr、流式细胞检测技术、 RT—PCR法、Westernbloting、免疫组织化学和TUNEL检测 survivin基因表达、细胞周期和细胞凋亡。结果：重组质 粒pTZU6+1一siRNA—survivin导入 BGC一823后，survivinmRNA和蛋白表达均明显下调；细胞生长被抑制，细胞 周期中s期细胞减少 ，G。／G。期细胞增加 ，出现明显细胞凋亡。裸鼠皮下移植瘤体积明显缩小，Survivin表达均下 调。体内、外对照组各指标均无明显变化。结论：RNA干扰明显抑制靶基因survivin在 胃癌细胞 BGC一823及裸鼠 皮下移植瘤中的表达及肿瘤细胞增殖，并诱导细胞凋亡，且特异性好 ，可能成为肿瘤治疗的新方法。 [关键词] RNA干扰；胃肿瘤；survivin；细胞凋亡 [中图分类号] R737．9 [文献标识码] A Inhibition ofsurvivin expressioninBGC 一823cellsbyRNA interference QIAOMin，XIANGTing—xiu，WANGPi—long (D‘epartmentofDigestiveDisease，ExperimemalResearchCemer，TheFirstAffiliatedHospital，ChongqingMedicalUniver- sity，Chongqing400016，China．E—mail：qiaominqiaomin@yahoo．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethefeasibilityandspecificityofgastriccarcinomagenetherapybyutilizing RNAinterference(RNAi)toinhibitsurvivinexpressioninvitroandinvivo．METHODS：SmallinterferenceRNA (siR— NA)homologoustosurvivinwasdesigned．pTZU6+1一siRNA —survivinvectorwasconstructedandtransfectedintoBGC 一 823cells．ThetransplantedBGC一823 tumorinnudemicewasestablishedtoinduceRNAi．Thechangesofsurvivin geneexpression，tumorcellcycleandcellapoptosisweredetectedbyflowcytometry，RT—PCR，Westernblotting，immu- nochemistryandTUNEL．RESULTS：TheexpressionofsurvivinwasobviouslyinhibitedbyRNAiinvitro．Th ephaseof cellcycleindicatedthereductionofSphase，whileG1／G0phaseincreased．Cellapoptosiswasobvious．BoththemRNA levelandtheproteinexpressionofsurvivindecreasedobviously．ThetumorsizereducedaftertreatedwithpTZU6+1一siR· NA —