Sonic+hedgehog阻断抗体增强外周血单个核细胞抗宫颈癌HeLa细胞的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(12)：2241—2246 · 2241 · [文章编号】 1000—4718(2011)12—2241—06 · 论 著 · Sonichedgehog阻断抗体增强外周血单个核细胞 抗宫颈癌 HeLa细胞 的作用米 孙 艳 ， 黄莉霞，．黄文浩， 黄 斌 (广东药学院生命科学与生物制药学院，广东 广州510006) [摘 要] 目的：探讨Sonichedgehog(Shh)阻断抗体对外周血单个核细胞(PBMCs)抗宫颈癌HeLa细胞作用 的影响。方法：免疫细胞化学技术和RT—PCR法检测Shh及其信号分子在HeLa细胞中的表达 ；Ficoll密度梯度离 心法分离正常人PBMCs，并与HeLa细胞建立共培养体系；于共培养体系中加入 Shh阻断抗体，流式细胞术检测 CD3、CD69和CD71分子表达；ELISA法检测细胞 因子 IFN一 、IL一10和 IL一4分泌；显微镜观察 PBMCs对HeLa 细胞的杀伤。结果：HeLa细胞表达Shh及其信号分子，HeLa细胞传代6次对Shh的表达水平没有影响；共培养体 系中CD3 细胞增多；Shh阻断抗体可以促进CD69、CD71表达和 IFN一 的分泌 ，但抑制IL一10分泌，对 IL一4分 泌没有显著影响；Shh阻断抗体增强PBMCs对 HeLa细胞的杀伤。结论：Shh阻断抗体可以促进 PBMCs活化 ，增强 PBMCs抗宫颈癌HeLa细胞的作用。 [关键词] Sonichedgehog蛋白；宫颈肿瘤；淋巴细胞 [中图分类号] R730．3 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．12．001 Anti-·SonichedgehogblockingantibodyenhanceskillingeffectofPBMCs oncervicalcarcinomaHeLacells SUN Yan，HUANG Li—xia。HUANG W en—hao．HUANG Bin (LfieScienceandBiopharmaceuticalCollege，GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangzhou510006，China．E— mail：sxmshw77@163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofanti—Sonichedgehog(Shh)blockingantibodyonthekilling effectofperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)OilcervicalcarcinomaHeLacells．METHODS：Theexpressionlev— elsofShhandShhsignalingmoleculesinHeLacellsweredetectedbyimmunocytochemistryandRT—PCR．PBMCsfrom healthpeopleswereisolatedbythemethodofFicolldensitygradienteentrifugation，andthenco—culturedwithHeLacells invitro．TheexpressionofCD3，CD69andCD71wasassayedbyflewcytometry．TheconcentrationsofIFN一 ，IL一10 andIL一4inculturesupernatnatsweredetectedbyELISA．ThekillingeffectofPBMCsonHeLacellswasobservedunder microscope．RESULTS：Shh andShh sign