不同浓度缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响.pdfVIP

维普资讯 生垦痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(4)：625—630 · 625 · [文章编号] 1000-4718(2008)04—0625—06 · 论 著 · 不同浓度缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液 对 PC12细胞缺氧耐受性的影响 李 宏 ， 高文祥 ，‘ 高钰琪 (第三军医大学高原医学系高原生理学与病理生理学教研室，全军高原医学重点实验室， 重庆400038；重庆教育学院生化系，重庆400067) [摘 要] 目的：探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(HPextract)对PC12细胞缺氧耐受性的影响。方法：复 制小鼠急性重复缺氧模型，制备HPextract。在培养PC12细胞中加入HPextract使其终浓度分别为0．2、0．8、3．2、 6．4、12．8g／L(HP组)。以同浓度正常小鼠脑匀浆提取液 (Nextract)作为对照组 (N组)。缺氧 (2％O)培养 24、 48、72h后，采用四唑盐(MTY)比色法检测各组细胞活力 (A，。值)并检测缺氧24、48、72h乳酸脱氢酶(LDH)透出 率、缺氧24h早期凋亡率 (AnnexinV—FITC／PI双染流式细胞仪检测)、缺氧72h晚期凋亡率 (Hoechst33258染色 荧光显微镜检测)。结果：HPextract浓度低于6．4s／L(包括6．4s／L)，缺氧培养24h时，HP组A 值显著高于同 浓度N组，其 LDH透出率显著低于同浓度N组。随缺氧时问延长，高浓度HPextract逐渐失去细胞保护作用。至 72h时浓度高于6．4s／L(包括6．4s／L)HPextract有促细胞凋亡作用，此时HP组A，。值显著低于同浓度N组，其 LDH透出率和晚期凋亡率均显著高于同浓度N组。结论：缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性 的影响呈浓度依赖性和时问依赖性。 [关键词] 缺氧预处理；小鼠；脑组织提取液；PC12细胞 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Effectsofbraintissueextractofhypoxia-·preconditionedmiceatdiffer— entconcentrationson tolerance0fPC12cellstohypoxia LIHong ，GAO Wen—xiang ，GAOYu—qi (K‘eyLaboratoryforHighAltitudeMedicineofPLA，SectionofPathophysiologyandHighAltitudePhysiology，Department ofHighAltitudeMilitaryMedciine，The MilitaryMedcialUniversity，Chongqing400038，China；DepartmentofLfie SciencesandChemistry，ChongqingCollegeofEducatoin，Chongqing400067，China．E—mail：gyq@mail．tmmu．com．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheeffectofbraintissueextractofhypoxia—preconditionedmice(HPex— tract)ontoleranceofPC12cellstohypoxia．METHODS：Themicemodelofacuterepetitivehypoxiawasreproducedand braintissueextractswereprepared．HPexrt