蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及凋亡的影响.pdfVIP

· 1420· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(7)：1420—1422 [文章编号] 1000—4718(2010)07—1420—03 蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及凋亡的影响 海广范， 李生莹，崔泰震， 白素平 (新乡医学院药学院，河南新乡453003) [摘 要] 目的：研究蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及细胞凋亡的影响。方法：MTI法测定蓝萼香茶 菜乙素对AGZY的细胞毒作用 ；PI染色、流式细胞术观察蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及细胞凋亡的影响。 结果：蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞的Ic 为0．11mmol／L，且随着蓝萼香茶菜乙素剂量增加对AGZY细胞抑制作 用增强；蓝萼香茶菜乙素可以降低 AGZY细胞 G／M期细胞数量，阻止细胞分裂。结论：蓝萼香茶菜乙素可阻滞 AGZY细胞的生长，阻滞细胞进入G：／M期，并诱导 AGZY细胞凋亡。 [关键词] 蓝萼香茶菜；AGZY细胞；细胞周期；细胞凋亡 [KEYWORDS] GlaucocalyxinB；AGZYcells；Cellcycle；Apoptosis [中图分类号] R966 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．07．037 蓝萼香茶菜[Isodonjaponica(Burm．fI)vaF．g 0c。f)％ Co．)；CO2培养箱 (ThermoFormaCo．LTD)；酶标仪 (Thermo (Maxim)Hara]为唇形科香茶菜属植物，是毛叶香茶菜的变 MultiskunMk3)。 种，又名山苏子，广泛分布于我国北方。长期以来 ，我国民间 2 方法 作为毛叶香茶菜用 ，具有健 胃、清热解毒、活血 、抗菌消炎和 2．1 蓝萼香茶菜乙素的配置及分组 称取蓝萼香茶菜乙素 抗癌活性 J。蓝萼香茶菜还具有与剂量相关的心肌保护作 3．74mg，加入 50 DMSO溶解，用 RPMI一1640培养液稀 用 J。二萜类化合物是蓝萼香茶菜的主要化学成分，研究表 释，配置成终浓度为 1mmoL／L原液 (DMSO浓度为0．01％)， 明蓝萼香茶菜甲素具有保护肝脏、抗癌等作用 j。蓝萼香茶 4℃冷藏保存。实验分为：对照组和用药组，对照组用含DM· 菜乙素也属于二萜类化合物 ，本实验通过观察不同剂量蓝萼 SO0．01％的RPMI一1640培养液培养，用药组加入蓝萼香茶 香茶菜乙素对AGZY细胞 (人肺腺癌细胞)的抑制作用 ，探讨 菜乙素，使其终浓度为 5i~mol／L、10I．Lmol／L、20pLmol／L、40 其对AGZY细胞周期和细胞凋亡的影响，进一步研究其抗肿 ~mol／L、8OI~mol／L，每组设置6个复孑L。 瘤作用。 2．2 MTF法测定肿瘤细胞的存活率 取对数生长期细胞 ， 细胞计数约1×10cells／L，接种于96孔板中，每孔液体 1130 材 料 和 方 法 ，细胞贴壁后倾去原液 ，换成含0．5％血清的RPMI一1640 1 材料 培养液饥饿培养。24h后更换培养液 ，加入蓝萼香茶菜乙素 1．1 AGZY细胞株 人肺腺癌细胞株 (AGZY细胞株)由新 使其浓度为5wmol／L、10i~mol／L、20wmol／L、40Ixmol／L、80 乡医学院实验室冻存。AGZY细胞在含有体积分数 10％新生 ~mol／L，继续培养24h，每孔加 15 M1tr，4h后倾去所有液 小牛血清、1×10U／L青霉素、1×10U／L链霉素的RPMI一 体，加 115 DMSO溶解 ，37℃静置0．5h，酶标仪570nm检 1640培养基中贴壁生长，于37℃、体积分数5％CO：培养箱 测，波长630nm参考。计算AGZY细胞抑制率和Ic卯。抑制 中培养 ，2d换液 1次，培养瓶铺满时用2．5g·L 胰酶消化 率=(1一测定组A值／正常对照组A值)×100％。